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細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMYF說明書
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMYF說明書細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應(yīng), 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMYF說明書復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒 ,英文名: CsA ELISA Kit
踝蛋白(talin)ELISA試劑盒 ,英文名: talin ELISA Kit
花生四烯酸5脂氧合酶(ALOX5/LOG5)ELISA試劑盒 ,英文名: ALOX5/LOG5 ELISA Kit
花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA試劑盒 ,英文名: ALOX-5 ELISA Kit
花生四烯酸15脂加氧酶(ALOX15/LOG15)ELISA試劑盒 ,英文名: ALOX15/LOG15 ELISA Kit
花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒 ,英文名: AA ELISA Kit
琥珀酰輔酶A合成酶(SCS)ELISA試劑盒 ,英文名: SCS ELISA Kit
紅細胞原卟啉(EP)ELISA試劑盒 ,英文名: EP ELISA Kit
紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒 ,英文名: EPOR ELISA Kit
紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 ,英文名: EPO ELISA Kit
紅細胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒 ,英文名: EMP ELISA Kit
紅細胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒 ,英文名: ESF ELISA Kit
橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒 ,英文名: sm Actinin-α ELISA Kit
小鼠磷酸化表皮生長因子受體(pEGFR)免疫試劑盒 Mouse phosphorylated epidermal growth factor receptor,pEGFR ELISA kit
小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)免疫試劑盒 Mouse phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,P-JNK ELISA kit
小鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)免疫試劑盒 Mouse lymphotactin,Lptn/LTN ELISA Kit
小鼠淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒 Mouse lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit
小鼠亮氨酸腦啡肽(Leu-ENK)免疫試劑盒 Mouse Leu-Enkephalin,Leu-ENK ELISA Kit
小鼠鏈球菌(SK)抗體(IgG)免疫試劑盒 Mouse streptococcal(SK)antibody(IgG)ELISA kit
小鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)免疫試劑盒 Mouse Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit
小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)免疫試劑盒 Mouse Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMYF說明書小鼠酪氨酸羥化酶(TH)免疫試劑盒 Mouse tyrosine hydroxylase,TH ELISA Kit
小鼠跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)免疫試劑盒 Mouse Transmembrane protein 97,TMEM97/MAC30 ELISA Kit
小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)免疫試劑盒 Mouse Clara cell protein,CC16 ELISA Kit
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