【儀表網(wǎng) 儀表標準】由新疆維吾爾自治區(qū)農(nóng)學(xué)會提出，新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院、塔里木大學(xué)、中國科學(xué)院上海營養(yǎng)與健康研究所、中糧屯河番茄有限公司、阿克蘇天山神木果業(yè)發(fā)展有限責(zé)任公司等單位負責(zé)起草的《番茄及其制品中鏈格孢毒素的檢測 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》團體標準已完成征求意見稿的編制，根據(jù)《新疆農(nóng)學(xué)會團體標準管理辦法(試行)》的相關(guān)規(guī)定，為保證標準的科學(xué)性、嚴謹性和適用性，現(xiàn)公開征求意見。
 

　　在加工番茄生長、采收、貯運、加工等過程中易受到病原微生物污染，特別是在貯藏期間，由鏈格孢屬真菌(Alternaria sp.)引起的番茄采后腐爛較重，不僅造成了極大的產(chǎn)量損失，還在番茄及其制品中積累了對人體健康有潛在威脅的鏈格孢毒素。其中，細交鏈孢菌酮酸(tenuazonic acid, TeA)的毒性和檢出含量都居各鏈格孢毒素之首，被美國食品藥物管理局列入有毒化學(xué)物質(zhì)登記冊，鏈格孢酚(alternariol, AOH)和鏈格孢酚單甲醚(alternariolmonomethyl ether, AME)具有急性毒性且可顯示協(xié)同效應(yīng)。2022年4月5日，歐盟發(fā)布(EU)2022/553號提議，用于修訂條例(EC)No401/2006 關(guān)于食品中鏈格孢毒素的監(jiān)測，監(jiān)測范圍包括加工番茄制品，規(guī)定了 AOH、AME 和 TeA 的限量值分別為 10、5、500 μg/kg。
 

　　新疆作為世界第三大加工番茄生產(chǎn)基地，番茄加工企業(yè)眾多，但是目前均沒有開展鏈格孢毒素的檢測，究其原因，一方面是國家還沒有強制要求開展此項工作，另一方面是缺乏統(tǒng)一的檢測方法。因此，制定番茄及其制品中鏈格孢毒素的標準檢測方法對于新疆加工番茄產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展很有必要。
 

　　本文件按照GB/T 1.1-2020《標準化工作導(dǎo)則 第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。參考GB/T 601 化學(xué)試劑標準滴定 溶液的制備；GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法；GB/T 27417 合格評定 化學(xué)分析方法確認和驗證指南標準；AOAC 2021 番茄、小麥和葵花籽中的鏈格孢毒素的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法等規(guī)程編制。
 

　　本文件規(guī)定了番茄及其制品(番茄醬、番茄汁、番茄丁、番茄沙司等)中的 5 種主要鏈格孢毒素(鏈格孢烯、鏈格孢酚、鏈格孢酚甲基醚、細交鏈孢菌酮酸和騰毒素)的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測法。
 

　　本文件適用于番茄、番茄醬、番茄汁、番茄丁、番茄沙司等中的鏈格孢烯、鏈格孢酚、鏈格孢酚甲基醚、細交鏈孢菌酮酸和騰毒素含量的測定和確證。
 

　　方法原理：
 

　　試樣中的鏈格孢烯、鏈格孢酚、鏈格孢酚甲基醚、細交鏈孢菌酮酸和騰毒素用甲醇/水/乙酸的混合溶液提取后，上清液經(jīng)固相萃取柱凈化，用超高壓液相色譜分離，串聯(lián)質(zhì)譜檢測，同位素內(nèi)標法定量。
 

　　儀器和設(shè)備：
 

　　1.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有 ESI 電離源、串聯(lián)四級桿質(zhì)量分析器。2.pH計。3.分析天平：感量0.01g、0.0001g。4.振蕩器。5.高速勻漿機。6.離心機：轉(zhuǎn)速不低于3000r/m。7.固相萃取裝置，帶真空泵。8.漩渦混合器。9.減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。10.氮吹儀。
 

　　試樣制備：
 

　　取代表性樣品約1kg，將其可食用部分切碎后，用高速勻漿機將樣品加工成漿狀，混勻，裝入潔凈的樣品瓶中，密封并標明標記，于-18 ℃冷凍保存。(注：在制樣的操作過程中，應(yīng)防止樣品受到污染。)
 

　　提取：
 

　　稱取2g(精確至0.01g)試樣于50mL 離心管中，加入100μL 同位素混合標準工作溶液，加入14.0mL 甲醇-水-乙酸溶液(5.8)，振蕩器提取45min，3000 r/m離心10min，將上層甲醇提取液轉(zhuǎn)移7.5mL(等于1.0g樣品)于新的50mL離心管中，用 1%乙酸水溶液(5.4)等體積稀釋，待凈化。
 

　　試樣溶液的測定：
 

　　取7.2、7.3處理得到的待測溶液進樣，內(nèi)標法計算待測液中目標物質(zhì)的質(zhì)量濃度，按8計算樣品中待測物的含量。試液中待測物的響應(yīng)值應(yīng)在標準曲線線性范圍內(nèi)，超過線性范圍則應(yīng)根據(jù)測定濃度進行適當倍數(shù)稀釋后重新測定。
 

　　精密度：
 

　　在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的20%。