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競(jìng)賽法可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。以測(cè)定抗原為例,受檢抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)賽與固相抗體,因而于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量成反比。
ELISA試劑盒操作過(guò)程如下:
(1)將特異抗體與固相載體銜接,形成固相抗體。洗刷。
(2)加底物顯色:參閱管中由于的酶標(biāo)抗原zui多,故色彩zui深。參閱管色彩深度與待測(cè)管色彩深度之差,代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測(cè)管色彩越淡,表示標(biāo)本中抗原含量越多。
(3)待測(cè)管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,使之與固相抗體反響。如受檢標(biāo)本中無(wú)抗原,則酶標(biāo)抗原能順暢地與固相抗體。如受檢標(biāo)本中含有抗原,則與酶標(biāo)抗原以相同的時(shí)機(jī)與固相抗體,競(jìng)賽性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體的時(shí)機(jī),使酶標(biāo)抗原與固相載體的量削減。參閱管中只加酶標(biāo)抗原,保溫后,酶標(biāo)抗原與固相抗體的可達(dá)zui充分的量。洗刷。
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