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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 GAP 人GTP酶活化蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 Flt-3L 人FMS樣*激酶3配體 規(guī)格： 48T/96T

 Flt3 人FMS樣*激酶3 規(guī)格： 48T/96T

 E-Selectin/CD62E 人E選擇素 規(guī)格： 48T/96T

 E-Cad 人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 EJ/GlyRS 人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體 規(guī)格： 48T/96T

 D2D 人D二聚體 規(guī)格： 48T/96T

 D2D 人D二聚體 規(guī)格： 48T/96T

 DBP 人DNA結合蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 DKK1 人Dickkopf 1 規(guī)格： 48T/96T

 CNP 人C型鈉尿肽 規(guī)格： 48T/96T

 C-Peptide 人C肽 規(guī)格： 48T/96T

 CRP 人C反應蛋白 規(guī)格： 48T/96T

LBA4404 電擊感受態(tài)細胞 50ul*10 CP 人C多肽 規(guī)格： 48T/96T

 CXCR3 人CXC趨化因子受體3 規(guī)格： 48T/96T

 CXCR1 人CXC趨化因子受體1 規(guī)格： 48T/96T

 CX3CR1 人CX3C趨化因子受體1 規(guī)格： 48T/96T

人c-sis ELISA Kit，48T/96T 人c-sis ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

人c-sis ELISA Kit，48T/96T 人c-sis ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 c-myc 人c-myc癌基因產物 規(guī)格： 48T/96T

人c-myc ELISA Kit，48T/96T 人c-myc ELISA

hì jì PUC19 容量： RT 1克

shēng huà shì jì PUC18 容量： RT 1克

shēng huà shì jì PNB(對硝基苯甲酸) 容量： 1米

shēng huà shì jì PLET瓊脂基礎 容量： 25克

shēng huà shì jì PH試紙 容量：

shēng huà shì jì Pfu酶 容量： 2～8℃，避光 1克

shēng huà shì jì PEA瓊脂 容量： 10張/盒

shēng huà shì jì PCR純化Kit 容量： 1公斤

shēng huà shì jì PBS緩沖液 容量： 保存：-20℃ 50次/250ul/支

shēng huà shì jì PALCAM添加劑 容量： 1米

shēng huà shì jì PALCAM瓊脂 容量： 100克

shēng huà shì jì O-乙酰-L-*鹽酸鹽 容量： 1公斤

shēng huà shì jì O-苯并三氮唑-N，N，N，N-四甲脲四氟硼酸酯 容量： 100克

shēng huà shì jì O-苯并三氮唑-N，N，N，N，-四甲脲六氟磷酸酯 容量： 1公斤

shēng huà shì jì Olig(Dt)15 容量： RT 25克

shēng huà shì jì OGY瓊脂 容量： 5克

shēng huà shì jì OED60K型發(fā)酵工業(yè)通用消泡劑 容量： 1公斤

shēng huà shì jì OED24K型酶制劑、抗生素發(fā)酵工業(yè)消泡劑 容量： 1克

shēng huà shì jì ?33mm水系濾器 容量： 保存：-20℃ 500U

Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

注意事項:

1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。