ATCC細胞采用間接ELISA法檢測所獲得的單克隆抗體細胞株的細胞上清和腹水效價。以 40 倍稀釋的免疫小鼠血清作為陽性對照，以 DMEM 細胞培養(yǎng)液、樣品稀釋液及健康小鼠血清作為陰性對照。以 A. acidoterrestris (ATCC49025)菌原液作為抗原包被酶標板，包被濃度為 1.475×106 個/mL，每孔 0.1 mL，37 °C 2 h，4 °C 過夜；拍干后加入封閉液 37 °C 封閉 2 h，拍干后進行檢測。加入倍比稀釋的細胞上清或腹水，37 °C 孵育 0.5 h，洗滌 3 次，再加入 1:20 000 稀釋的 HRP 標記的羊抗鼠抗體，37 °C 孵育 0.5 h，洗滌后加底物顯色 10 min，加終止液終止反應，用酶標儀測定 OD450值， P/N≥2.1 為陽性，否則為陰性。
單克隆抗體亞類鑒定如表6所示；細胞培養(yǎng)上清、腹水效價測定及亞類鑒定結果。由表 7 可知，3F7 和 9C4 的抗體細胞上清效價和腹水效價較穩(wěn)定，而 3E12 抗體細胞上清效價檢測時跳孔嚴重，腹水無效價，這與其抗體亞類不同密切相關。
取對數(shù)生*ATCC細胞于 10%血清培養(yǎng)基中培養(yǎng) 48−54 h，將秋水仙素加入培養(yǎng)液，使其終濃度為 0.1 µg/mL，繼續(xù)培養(yǎng) 4−6 h。小心吹打貼壁細胞， 1000 r/min 離心 10 min 后進行低滲處理。隨后固定細胞、制片，用新鮮Giemsa染色液染色10−20 min，鏡檢觀察記錄并進行顯微拍照。染色體計數(shù)結果發(fā)現(xiàn)：所得雜交瘤細胞的染色體數(shù)目處于 98−100 條之間，符合預期數(shù)量。
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ATCC細胞