當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>科研抗體>>抗體抗原>> 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體
免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體 |
英文名稱 | CCDC28B |
貨號 | BJ-K7882 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。?
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
DPP9 antibody98 kDa, 60 kDa Q86TI2Human, Mouse 資源名稱環(huán)鏈棒束孢提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no
DPPA2 antibody34 kDa Q7Z7J5Human資源名稱斜鏈棒束孢提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no
DPPA4 antibody34-40 kDa Q7L190Human資源名稱粉質(zhì)棒束孢提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no
DPYS antibody57kdQ14117Human, Mouse, Rat資源名稱間型彎孢提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no
DR1 antibody19 kDaQ01658Human, Mouse, Rat資源名稱黑細基格孢提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no
DR3 antibody17-20 kDa Q93038Human, Mouse 資源名稱尖鐮孢古巴?;停ㄏ憬犊菸【┨峁┬问?斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no
DR4 antibody44-50 kDa O00220Human資源名稱葡萄座腔菌(蘋果干腐病菌)提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no
少孢酵母號:700240-7英文名字:albuminfromhumanserum分子量:66478Da物理性狀及指標:外觀:凍干粉
白腐菌屬號:9007-34-5英文名字:RattailtendoncollagenTypeI無塵車間內(nèi)生產(chǎn),保證潔凈度可用于包被細胞培養(yǎng)器皿(單分子層包被)也可形成具有一定強度的三維膠用于細胞的三維空間培養(yǎng)
煙色紅曲霉號:V英文名字:IgGfromGuineapigserum動物血清中免疫球蛋白(IgG)廣泛應用于免疫學、分子生物學及醫(yī)學等生命科學的各個研究領(lǐng)域,既可作為大分子球蛋白用于生物化學的研究,也可以作為抗原用于免疫學和醫(yī)學研究。公司采用親和層析純化的方法,純化得到各種高純度的IgG,純度在90%以上。產(chǎn)品形式均為凍干粉,穩(wěn)定性強,4度保存2年以上。
溝鯰愛德華氏菌號:90486英文名字:Albumin,frombovineProteasefree物理性狀及指標:外觀:凍干粉蛋白酶:不含
變異庫克菌號:9001-32-5英文名字:Fibrinogenfrombovineplasma物理性狀及指標:外觀:白色或類白色凍干粉末或塊狀物水分:應不高于5.0%
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體 Winogradskyla pulchriflava Mouse CAD (Caspase Activated Dnase) Kit 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞
比阿婁維扎青霉 Mouse CTNNa1 (Catenin, Alpha 1) Kit 人正??谇唤琴|(zhì)細胞
枯草芽孢桿菌Mouse CTNNb1 (Catenin, Beta 1) Kit 人腦星形膠質(zhì)瘤細胞
黑腐皮殼Mouse CTSD (Cathepsin D) Kit 人胃平滑肌細胞
解脂假絲酵母Mouse CTSK (Cathepsin K) Kit人膀胱平滑肌細胞
洛格酵母Mouse CTSL (Cathepsin L) Kit 人外周血B淋巴細胞
香菇Mouse CDX2 (Caudal Type Homeobox Transcription Factor 2) Kit 小鼠肺腺癌細胞
相思根瘤菌Mouse CAV1 (Caveolin 1) kit小鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞
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