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DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ)

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更新時間:2015-05-18 15:13:54瀏覽次數(shù):253次

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DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ)用途:用于彎曲桿菌的DNA酶水解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))。原理:
具有脫氧核糖核酸酶的細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的脫氧核糖核酸(DNA),使DNA長鏈水解成數(shù)個單核苷酸的寡核苷酸短鏈,使指示劑甲基綠水作用變成粉紅色;植物蛋白胨,胰酪蛋白胨提供氮源,營養(yǎng)素;氯*鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是凝固劑。
DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ)配方:(g/L)
DNA 
植物蛋白胨 
胰酪蛋白胨 
氯*鈉 
瓊脂 
pH值7.3 ± 0.1
2.0 
5.0 
5.0 
5.0  
15.0
25℃
DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ)原理:
        具有脫氧核糖核酸酶的細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的脫氧核糖核酸(DNA),使DNA長鏈水解成數(shù)個單核苷酸的寡核苷酸短鏈,使指示劑甲基綠水作用變成粉紅色;植物蛋白胨,胰酪蛋白胨提供氮源,營養(yǎng)素;氯*鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是凝固劑。
用法:

        稱取本品 42.0g,徐徐加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶 ,121℃高壓滅菌 15 分鐘, 
 冷至 50℃左右時,每 100ml 培養(yǎng)基中加入過濾除菌的0.5%甲基綠水溶液 1ml ,混勻,傾注平板。 
甲基綠配制 (MG):配制 0.5% 甲基綠水溶液。用等體積氯仿作 5-7 次抽提,直到氯仿層無色為
止。過濾除菌保存。 每 100ml 滅菌溶化的本培養(yǎng)基加入 1ml  ( MG ) 染色液 ,甲基綠zui終濃度
為 0.005%。

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