昨天我司的錢在頁面留言中看到了一個(gè)新手朋友的求助。
客戶:我用ELISA雙抗夾心的方法檢測NGF,做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)值很低,搞不懂是什么原因造成的,我是新手不知是否有些細(xì)節(jié)自己沒有注意到
錢:如果試劑盒很貴,自己又沒有操作過建議找專也人員幫你做!
客 戶:試劑盒是很貴,不過我還是希望自己能做出來。
錢:你用的是人血清還是組織勻漿?注意滴加計(jì)量的把握!查過文獻(xiàn)嗎?它在你的組織中表達(dá)是否較高?
客戶:我要檢測的是細(xì)胞培養(yǎng)基中細(xì)胞分泌的蛋白量,表達(dá)量不高,作出來的幾個(gè)曲線很不標(biāo)準(zhǔn),線性關(guān)系不明顯,我不知道是為什么。
錢:ELISA 是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn)又可以用于少量標(biāo)本的檢測,既可以做定性試驗(yàn)也可以做定量分析等優(yōu)點(diǎn),已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。ELISA 的影響因素較多,加強(qiáng)質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。一般加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法 ELISA )需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1 分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。垂直加入,避免漏吸或少吸,洗滌時(shí)避免串孔等等諸多值得注意的地方.所以一定要多加練習(xí)!
相信經(jīng)過錢的全面解析這位朋友下次的實(shí)驗(yàn)一定會成功的。
我公司是一家科學(xué)檢驗(yàn)、研發(fā)和銷售為一體的生物技術(shù)型公司,公司成立以來跟諸多高等院校、科研院所有所合作。選購elisa試劑盒首先上海滬鼎生物科技有限公司。
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