免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些?上海滬鼎生物科技有限公司給您分析:
1、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯誤。不知抗體是進口的還是國產(chǎn)的工作液,怎么這么高稀釋度也沒能做出陽性結(jié)果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結(jié)果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索適當濃度。
2、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是恰當?shù)臅r間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復。
3、組織切片本身這種抗原含量低;
4、血清封閉時間過長。
5、DAB孵育時間過短。
6、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內(nèi)參與反應。
7、開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等外的方法問題。
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