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更新時間:2016-01-30 13:57:40瀏覽次數(shù):382次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)大鼠樹突狀細胞表面特異性C型凝集素-細胞間黏附分子3結(jié)合非整合素分子(DC-SIGN/CD209)Rat DC specific intercellular adhesion molecule 3-grabbing nonintegrin,DC-SIGN/CD209 ELISA試劑盒 96T/48T
黑色素瘤,MM96L細胞 大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒Rat procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISA試劑盒96T/48T
大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒 Rat A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA試劑盒96T/48T
大鼠c-fos ELISA試劑盒Rat c-fos ELISA試劑盒96T/48T
ATCC細胞株的品質(zhì),黑色素瘤,MM96L細胞 國內(nèi)細胞的價格。對于初做細胞培養(yǎng)研究的工作者來說,會經(jīng)常出現(xiàn)細胞培養(yǎng)問題,公司在細胞培養(yǎng)問題方面做了些總結(jié),希望對你們能有所幫助。
【黑色素瘤,MM96L細胞培養(yǎng)液pH值變化太快】CO2張力不對。培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足。培養(yǎng)液中鹽濃度不正確。細菌、酵母或真菌污染。
按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應(yīng)CO2濃度為5%到10%。(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液,松開瓶蓋1/4圈,加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度,在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,但pH值不變】用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養(yǎng)基成分沉淀下來。冰凍保存培養(yǎng)液,用去離子水反復(fù)沖洗玻璃器皿,然后除菌,將培養(yǎng)液加熱到37℃,搖動使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,同時pH 發(fā)生變化】細菌或真菌污染,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)細胞不貼壁】*消化過度;支原體污染;培養(yǎng)液中無貼壁因子,縮短*消化時間或降低*濃度,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
【懸浮細胞成簇】培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子。支原體污染。蛋白酶過度消化使得細胞裂解釋放DNA,用無鈣鎂*洗滌細胞,輕輕吹吸細胞獲得單細胞懸液,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物,用DNase I處理細胞。
【原代細胞培養(yǎng)物污染】原代培養(yǎng)組織在進入培養(yǎng)前已污染,培養(yǎng)前用含高濃度抗生素的*反復(fù)沖洗組織。
【培養(yǎng)細胞死亡】培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2。培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大。細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷。培養(yǎng)液滲透壓不正確。培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積;檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;取新的保存細胞種;檢測培養(yǎng)液滲透壓。注意:大多數(shù)哺乳動物細胞能耐受滲透壓為260–350mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓,換入新鮮培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)細胞生長減慢】由于更換不同培養(yǎng)液或血清。培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如*或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染。試劑保存不當。
比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗。
1)增加起始培養(yǎng)細胞濃度。
2)讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。
3)換入新鮮配制培養(yǎng)液。
4)補加*或生長因子。
5)用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物?;蛴每股爻?。
6)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2–8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2–8℃7)保存,并在2周內(nèi)用完。
8)接種細胞起始濃度太低,細胞已老化,支原體污染。
9)增加接種細胞起始濃度。
10)換用新的保種細胞。
11)分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒Rat soluble Interleukin 2 recepter,IL-2sR ELISA試劑盒96T/48T
大鼠軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒Rat Netrin-1,Ntn1 ELISA試劑盒96T/48T
大鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒Rat Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA試劑盒96T/48T
大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒Rat anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA試劑盒96T/48T
大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 Rat C-opeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISA試劑盒96T/48T
大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒Rat phospho-inhibitory subunit of NF-κBα,pIKBα ELISA試劑盒96T/48T
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