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技術(shù)文章

外泌體的提取方法盤點(diǎn)

閱讀:21發(fā)布時(shí)間:2024-12-1

 獲得高純度的外泌體是開展后續(xù)研究的基礎(chǔ)。目前分離外泌體的方式有許多種,如:

1.色譜法

2.超濾法

3.多聚物沉淀法

4.磁珠免疫法等

 

        但超速離心法仍舊是業(yè)內(nèi)推崇的外泌體分離金標(biāo)準(zhǔn),這是因?yàn)槌匐x心法可以準(zhǔn)確地重復(fù)獲取外泌體,同時(shí)較大限度減少蛋白質(zhì)聚集體和雜質(zhì)離子的共純化現(xiàn)象。如果選擇超速離心法,那么可以依托日立離心機(jī),來(lái)獲取更高純度的外泌體。

 

        基于超速離心法的CP100NX 外泌體分離方案,依托于超速離心機(jī)的外泌體分離方案大致有兩種:分別是差速離心法和密度梯度離心法。

 

        其中密度梯度離心法可以成功地將亞細(xì)胞成分(例如過(guò)氧化物酶體,線粒體等)分離到密度梯度溶液中的不同層中。外泌體粗提樣品被放置在梯度液頂部,當(dāng)施加離心力時(shí),樣品中的顆粒以特定的速率通過(guò)梯度,該梯度以從上到下的密度增加。

 

        樣品中的外泌體將在 1.15-1.19 g/ml 的密度范圍富集,隨后可以通過(guò)分餾收集。密度梯度超速離心對(duì)從蛋白質(zhì)聚集體和非膜顆粒中分離出外泌體非常有效。在日常分離中,兩種離心方法可以搭配使用,會(huì)有助于獲取更高純度的外泌體。

 


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