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當(dāng)前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞凋亡與增殖>> CFSE細胞增殖與毒性檢測試劑盒
| 貨號 | FS-X9721 |
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產(chǎn)品介紹：
熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細胞進行熒光標(biāo)記的新型染料，可以標(biāo)記活體細胞。CFSE是一種帶有琥珀酰亞胺(NHS)的熒光染料，可以結(jié)合細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。CFSE在結(jié)構(gòu)上將酚羥基部位改造成AM 體，所以自身不發(fā)熒光，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細胞膜，在活細胞內(nèi)與胞內(nèi)蛋白共價結(jié)合，進入細胞內(nèi)的CFSE的AM 部位能被細胞內(nèi)酯酶水解發(fā)出綠色熒光。CFSE的琥珀酰亞胺(NHS)和細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基部位結(jié)合，固定在細胞內(nèi)，不會漏出細胞外。CFSE 進入細胞后定位于細胞膜、細胞質(zhì)和細胞核，在細胞核的熒光強。 在細胞分裂增殖過程中，CFSE的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細胞增殖，細胞周期的估算及細胞分裂等方面。CFSE標(biāo)記細胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，CFSE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀(FL1 通道)根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次(1/2的熒光強度)，二次(1/4的熒光強度)，三次(1/8的熒光強度)，以及更多分裂次數(shù)的細胞。CFSE可檢測分裂次數(shù)多達八次甚至更多。經(jīng)CFSE標(biāo)記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。 CFSE標(biāo)記的細胞用于體內(nèi)觀察可以長達數(shù)周之久，它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。CFSE 毒性小，不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患?？梢愿焖伲鼫?zhǔn)確和更安全地得到想要的實驗數(shù)據(jù)。 CFSE標(biāo)記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可以用于成纖維細胞、NK 細胞等其它細胞的增殖檢測。 CFSE標(biāo)記細胞呈綠色熒光，熒光波長：λex=496 nm,λem=516 nm。流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為516nm，使用流式細胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。CFSE標(biāo)記的細胞除了流式細胞儀檢測細胞增殖外，還可用熒光酶標(biāo)板定量活細胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。 儲存條件：CFSE須-20℃避光保存，注意防潮。 有效期：六個月。 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
500T | FS-X9721 |
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟：
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
促狀腺激(TSH)英文名：TSH 腺苷環(huán)化10抗體包裝5g
促黃體激(LH)英文名：LH 腺苷環(huán)化5抗體包裝25g
促紅細胞生成(EPO)英文名：EPO 腺苷環(huán)化6抗體包裝5g
雌三(E3)英文名：E3 腺苷環(huán)化9抗體包裝5g
雌激硫轉(zhuǎn)移(SULT1E1)英文名：SULT1E1 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2（2號染色體）抗體包裝1g
雌激(E)英文名：E 三磷腺檸檬裂解抗體包裝5g
雌二受體(ER)英文名：ER β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體包裝25g
雌二(E2)英文名：E2 內(nèi)收蛋白a1抗體包裝5g
垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)英文名：PACAP α2纖溶色上皮衍生因子抗體包裝100ml
垂草扁桃(VMA)英文名：VMA 膜粘連蛋白7抗體包裝25ml
穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)英文名：PF/PFP 早老γ分泌抗體包裝5ml
程序性死亡1(PD-1)英文名：PD-1 鈉ATP蛋白a1抗體包裝100ml
成纖維細胞生長因子9(FGF9)英文名：FGF9 Rho鳥苷交換因子2抗體包裝25ml
成纖維細胞生長因子8(FGF8)英文名：FGF8 磷化Rho鳥苷交換因子2抗體包裝1g
成纖維細胞生長因子6(FGF6)英文名：FGF6 去整合樣金屬蛋白9抗體包裝25g
載脂蛋白E抗體結(jié)締組織生長因子(CTGF)Clemizole is a H1 histamine receptor antagonist.Recently, researchers have ident
CFSE細胞增殖與毒性檢測試劑盒微黃綠鏈霉 1-十二烷基溴化鎂激肽釋放2
炭黑曲霉 (R)-N-叔丁氧羰基-3-氨基-3-苯基-1-激肽釋放6
多產(chǎn)色鏈霉 1,3,5-三(二甲基基)-1,3,5-六氫化三激肽原
喬木鏈格孢 3-溴-5-硝基-2-羥基吡啶激肽原1
腐皮殼 Fmoc-statine低密度脂蛋白
樹舌 4-三氟甲基低密度脂蛋白受體
米根霉 乙酸金 (metals basis)集落激因子
藍微褐鏈霉 3-甲基-4-吡唑幾丁質(zhì)3樣蛋白1
膠孢 1-環(huán)丁基肼鹽酸鹽己糖激
孢木霉 3-溴-1,2-苯二己糖激II
長孺孢 2-基-2-甲基酸乙酯喋呤
灰色產(chǎn)色鏈霉 4,6-二羥基-5-溴嘧啶甲基二酸
星孢毛銹傘 4-甲脒鹽酸鹽（易）甲殼質(zhì)蛋白40
鏈格孢 1-Cbz-4-氨甲基
固氮 L-高精酸甲胎蛋白
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