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免疫抑制劑(6-Mercaptopurine)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 16:38:34瀏覽次數(shù):201次

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貨號 FS-X11012
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ACTH(mouse adrencocorticotropic hormone) ELISA Kit 小鼠促腎上腺皮質激 Standard for GC, ≥99.9% (GC)
ALP-B(M

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱:免疫抑制劑(6-Mercaptopurine)

英文名稱:6-Mercaptopurine

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|100mg|500mg

貨號:FS-X11012

產(chǎn)品介紹:

Mercaptopurine(6-mercaptopurine;6-MP)是免疫抑制劑。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:50-44-2

別名:Mercaptopurine;6-MP

純度:96.93%

分子量:152.18

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鏈格孢Pseudomonas corrugata大鼠補體蛋白3(C3)

球黑孢菌Pseudomonas corrugata大鼠疊氮胸(AZT)

蔥綠鏈霉菌Pseudomonas cunninghamiae大鼠疊氮胸(AZT)

靈芝Pseudomonas fluorescens大鼠多巴(DA)

薄花邊傘Pseudomonas ficuserectae大鼠多巴(DA)

甘蔗生節(jié)棱孢Pseudomonas fluorescens大鼠高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)

釀酒酵母Pseudomonas fluorescens大鼠高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)

韓國溶桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠高敏甲狀腺(u-T4)

美澳型核果褐腐病菌Pseudomonas fluorescens大鼠高敏甲狀腺(u-T4)

五指山布勒擔子酵母Pseudomonas fluorescens大鼠谷脫羧自身抗體(GAD-Ab)

耐鹽魏斯氏菌Pseudomonas fluorescens大鼠谷脫羧自身抗體(GAD-Ab)

黑曲霉Pseudomonas fluorescens大鼠甲狀旁腺激相關蛋白(PTHrP)  

淡紫擬青霉Pseudomonas fluorescens大鼠甲狀旁腺激相關蛋白(PTHrP)  

金色馬賽菌Pseudomonas fluorescens大鼠甲狀旁腺激相關蛋白(PTHrP)  

釀酒酵母Pseudomonas fluorescens大鼠甲狀旁腺激相關蛋白(PTHrP)  

串珠鐮孢菌*Pseudomonas fluorescens大鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)

腸道肽轉運蛋白2抗體間座殼乙酰轉移(ChAT)比色法測試盒

蛋白激Cbeta1/2抗體癤葡萄座腔菌過氧化氫(CAT)比色法測試盒 分光光度計

尿激型纖溶原激活因子抗體淡色生赤殼菌髓過氧化物(MPO)比色法測試盒

外周髓鞘蛋白-22抗體棲稻黃色單胞菌酯(CHE)比色法測試盒
免疫抑制劑(6-Mercaptopurine)大豆慢生根瘤 5-甲氧基; 5-甲氧基莰非

酒色青霉 乙酰三鋰鹽

假單胞 (+)-異蘿芙木堿

島生異擔孔 乙氧化

纖維鏈霉 氧化

丁香假尾孢 蘿芙木明堿

費氏中華根瘤 酮脫羧

蜘蛛白僵 (-)-落葉松脂

短小芽孢桿 酮氧化

交鏈孢屬 谷草轉氨

pYes2.0 (-)-丁香樹脂

耶納農(nóng)球 N-乙酰神經(jīng)縮

芽孢桿屬 直立角茴香堿

乳桿屬 ?;铣?/span>

戈氏鏈球 異直立角茴香堿
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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