人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)產(chǎn)品詳細(xì)資料
產(chǎn)品編號(hào) BYS10654B
英文名稱 Human anti-endothelial cell antibody,AECA Elisa Kit
ELISA技術(shù)流程ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。
人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為36 mIU/L,24 mIU/L ,12 mIU/L,6 mIU/L,3mIU/L)。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
8.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)更多產(chǎn)品:
同型半*(Hcy)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human phospholipid antibody,Apl/APA Elisa試劑盒
apelin 12(AP12)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human Homocysteic acid,Hcy Elisa試劑盒
超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human apelin 12,AP12 Elisa試劑盒
15脂加氧酶(15-LO/LOX)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP Elisa試劑盒
肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human 15-lipoxygenase,15-LO/LOX Elisa試劑盒
血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ Elisa試劑盒
過敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human Serum amyloid A,SAA Elisa試劑盒
補(bǔ)體片斷5a(C5a)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human Complement fragment 4a,C4a Elisa試劑盒
補(bǔ)體片斷3a(C3a)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human Complement fragment 5a,C5a Elisa試劑盒
糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human Complement fragment 3a,C3a Elisa試劑盒
糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human Glycogen phosphorylase II,GP-II Elisa試劑盒
糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)酶聯(lián)免疫試劑盒,96T/48T主打產(chǎn)品 Human Glycogen phosphorylase MM,GP-MM Elisa試劑盒
人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。