產(chǎn)品名稱 | 原代人滑膜細胞 | 英文名稱 | Human Synovial Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1001 |
組織來源 | 滑膜組織 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
細胞簡介：
人滑膜分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu)，各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，同時在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎（OA）以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?，其病理改變累及關(guān)節(jié)的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關(guān)節(jié)的退變?；ぜ毎菢?gòu)成滑膜層的最大細胞群體，是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中，基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布。滑膜由A型（巨噬樣滑膜細胞）、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成。滑膜細胞主要功能：①滑膜細胞產(chǎn)生潤滑液成分，并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guān)；②滑膜細胞增生，表現(xiàn)為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應(yīng)分子來促進炎癥和關(guān)節(jié)損壞；③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。
方法簡介：
公司實驗室分離的人滑膜采用混合酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人滑膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中，盡可能的除去結(jié)締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中，倒置于細胞培養(yǎng)箱中，
4) 2h后，培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基，小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細胞融合達到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內(nèi)皮細胞重新鋪瓶。
人星形膠質(zhì)細胞 | 小鼠肝細胞 |
大鼠心肌細胞 | 類鼻疽伯克霍爾德菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人的腎小球內(nèi)皮細胞 | 伯克氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠腎足細胞 | (駱駝痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人支氣管上皮細胞 | 肉芽腫鞘桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人肥大細胞 | 結(jié)腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠胚胎成纖維細胞 | 大腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
MDA-KB2人乳腺細胞 | 胎兒彎曲桿菌性病亞種探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠小膠質(zhì)細胞 | 鼻疽伯克霍爾德氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人心肌細胞 | 洋蔥伯克氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 | 羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人皮膚成纖維細胞 | 牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人肝星狀細胞 | 原代人滑膜細胞水牛正痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人急性單核細胞白血病細胞 | 布魯氏桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
耶爾森菌 / 志賀氏菌檢測試劑盒( 雙重熒光 PCR 法 ) | 輪狀病毒（C組）PCR檢測試劑盒（熒光PCR法） |
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)，然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落，再加入培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。
4、細胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細胞，然后將細胞懸液轉(zhuǎn)移至適當面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
