魚油產(chǎn)品中EPA、DHA含量測定氣相色譜儀
魚油產(chǎn)品中EPA、DHA含量測定氣相色譜儀
普瑞GC-9280型氣相色譜分析法通過新的樣品處理方法和相應色譜條件的選擇，實現(xiàn)對魚油等保健品中EPA、DHA的含量測定。普瑞GC-9280型氣相色譜分析法通過直接加入2，6-二叔丁基對甲酚(bht)、內(nèi)標二十三酸甲酯、鹽類物質(zhì)來配置標準品和樣品溶液，直接進樣進行測定。通過對此方法做了方法學驗證，專屬性好，無雜質(zhì)干擾；線性關系：r2＝0.9998；精密度6針EPA含量rsd為0.49％，DHA含量rsd為0.36％；回收率EPA達到99.5％，DHA達到99.7％。各項驗證指標良好，均符合法規(guī)要求。且本方法測定簡便易行，適用于工業(yè)生產(chǎn)中不同批次魚油樣品的測定。
作為優(yōu)選，樣品溶液的配制方法：
魚油原料：稱取20mg樣品于玻璃瓶中，按照衍生化部分描述進行操作；
魚油軟膠囊：取20粒軟膠囊的內(nèi)容物于一燒杯中，充分混合，確保不分層，然后按照衍生化部分描述進行操作。
與現(xiàn)有技術相比，普瑞GC-9280型氣相色譜分析法具有如下顯著優(yōu)點：
1、普瑞GC-9280型氣相色譜分析法是以GC法測定魚油中EPA和DHA的含量，而且此GC法適用于軟膠囊、魚油原料中EPA和DHA含量的測定。
2、普瑞GC-9280型氣相色譜分析法先用20g/l氫氧化鈉-甲醇溶液與樣品進行皂化反應后，再用甲醇溶液與樣品溶液進行反應，可更甲酯化樣品。
3、用bht異辛烷溶液溶解樣品，除易于溶解相應樣品外，bht還能起到抗氧化作用，減少樣品處理過程中的損失。
4、內(nèi)標法的運用，保證檢測結(jié)果的準確。
5、色譜柱選擇hpinnowax，30m×0.25mm，0.25μm,能更好的對組分進行分離的同時，節(jié)約儀器運行時間。
6、根據(jù)魚油中各組分沸點的不同，對柱溫溫度進行選擇，能更好分離樣品，節(jié)約儀器運行時間。
以下所用試品及試劑：
試劑：丁羥甲苯(bht)：分析純；二十三酸甲酯：標準品；氫氧化鈉：分析純；甲醇：色譜級；14％甲醇溶液：分析純；異辛烷：色譜級；氯化鈉：分析純；分析純；水：超純水。
標準品：EPA甲酯批號：bcbm9475v，純度：≥98.5％，來源：sigma-aldrich
DHA甲酯批號：bcbn2286v，純度：≥98.5％，來源：sigma-aldrich；
樣品：1.魚油軟膠囊，2.魚油原料，
例1魚油軟膠囊中EPA、DHA含量的測定
魚油軟膠囊EPA和DHA含量的測定：
(1)bht溶液
取50mgbht溶于1000ml異辛烷。
(2)內(nèi)標溶液
精密稱取150mg二十三酸甲酯于25ml容量瓶，用bht溶解，并稀釋至刻度。
(3)對照品溶液的配制：
分別精密稱取16mgEPA標準品、12mgDHA標準品于10ml容量瓶，用內(nèi)標溶液溶解，并稀釋至刻度線。
(4)樣品處理：
成品(軟膠囊)：取20粒軟膠囊的內(nèi)容物于一燒杯中，充分混合，確保不分層。然后按照衍生化部分描述進行操作。
(5)衍生化：
移取2.0ml內(nèi)標溶液于每一玻璃瓶中，氮氣吹干；加入1.5ml20g/l的氫氧化鈉-甲醇溶液，擰緊聚四氟乙烯瓶帽；水浴加熱并攪拌7min。冷卻至室溫；加2ml甲醇溶液，擰緊瓶帽；水浴加熱，并時時振搖30min；冷卻至40～50℃，加入1ml異辛烷；轉(zhuǎn)移溶液至20ml試管；加蓋，并快速振搖30s；立刻加入5ml飽和氯化鈉溶液于玻璃瓶中；加蓋，振搖15s；轉(zhuǎn)移上層液于10ml試管；用1ml異辛烷重復萃取；分兩次用1ml水沖洗異辛烷層；用干燥，得到待檢測樣品溶液。
(6)采用氣相色譜儀對樣品進行檢測：
色譜條件：進樣量1μl，
a)色譜柱：hpinnowax，30m×0.25mm，0.25μm；
b)載氣：氮氣；
c)柱溫：170℃，保持5min；1.5℃/min至188℃保持2min；1.0℃/min
至212℃；5.0℃/min至230℃保持10min；
d)進樣口溫度：250℃；
e)檢測器溫度：280℃；
f)分流比：75:1；
g)進樣體積：1μl；
h)流速：1.0ml/min；
i)氫氣流速：40ml/min；
j)空氣流速：400ml/min。
(7)根據(jù)峰面積及計算公式計算，得到樣品EPA和DHA的含量：
式中：
樣品比率(EPA，DHA)------樣品的峰面積(EPA，DHA)/內(nèi)標峰面積(EPA，DHA)；
標準品比率(EPA，DHA)-------標準品的峰面積(EPA，DHA)/內(nèi)標峰面積(EPA，DHA)。
儀器特點
(1) 采用了技術百兆/千兆以太網(wǎng)通信接口、并內(nèi)置IP協(xié)議棧、使儀器可以通過企業(yè)內(nèi)部局域網(wǎng)、互聯(lián)網(wǎng)實現(xiàn)遠距離的數(shù)據(jù)傳輸；方便實驗室的架設、簡化實驗室的配置、方便分析數(shù)據(jù)的管理；
(2) 儀器內(nèi)部設計3個獨立的連接IP地址，可以連接到工作電腦（實驗室現(xiàn)場）、分管電腦（如質(zhì)檢科、生產(chǎn)部等）、以及高管電腦，需要時可實時監(jiān)控儀器的運行以及分析數(shù)據(jù)結(jié)果；
(3) 儀器配備的專用工作站可以同時支持多臺色譜儀接入，實現(xiàn)數(shù)據(jù)處理以及儀器反向控制，簡化文檔管理；
(4) 儀器可以通過互聯(lián)網(wǎng)連接到生產(chǎn)廠家，實現(xiàn)遠程診斷、遠程更新等（需用戶設置）；
(5) 儀器配備的8吋彩色液晶觸摸屏，支持熱插拔，可作手持控制器使用；
(6) 儀器采用了多處理器并行工作方式，使儀器更加穩(wěn)定可靠；可選配多種高性能檢測器選擇，如FID、TCD、ECD、FPD和NPD，最多可同時安裝三個檢測器，滿足復雜樣品的分析需求。
儀器采用模塊化的結(jié)構(gòu)設計，后期維護簡單方便。
(7) 全新的微機溫度控制系統(tǒng)，控溫精度高，可靠性和抗干擾性能；具有八路獨立的溫度控制輸出，可實現(xiàn)二十階程序升溫，具有柱箱自動后開門系統(tǒng)，近室溫控制能力得到提高，升/降溫速度更快；
(8) 色譜機內(nèi)置低噪聲、高分辨率24位AD電路，并具有基線存儲、基線扣除的功能。
技術指標
操作顯示：彩色液晶觸摸屏
溫控區(qū)域：8路
外部事件：8路；輔助控制輸出2路
進樣器種類：填充柱進樣、毛細管進樣、六通閥氣體進樣、自動進樣器
檢測器數(shù)目：3個（最多）；FID、TCD、ECD、FPD和NPD任選
啟動進樣：手動、自動可選
通信接口：以太網(wǎng)：IEEE802.3
溫度控制
柱室溫度；
控溫范圍：室溫加+3℃～399℃。
控溫精度：優(yōu)于±0.1℃。
溫度梯度：室溫加+3℃～399℃，柱室有效區(qū)域內(nèi)不大于1%。
設定溫度與指示溫度之間偏差不大于1℃。
設定溫度和實際溫度之間的偏差不大于2%。
升溫階數(shù)：20階。
設定升溫速率：0.1～60℃/min。
線性程序升溫范圍：
每分種30℃時為150℃。
每分種15℃時為300℃。
每分種10℃時為350℃。
初溫終溫控制時間：0～600min。
程序升溫的重復性不大于2%。
降溫速度：由300℃降至50℃所需時間不大于10min。（其它檢測器溫度升至300℃）。
汽化室、檢測室溫度
控溫精度：
汽化室：±0.1℃（室溫+5℃至200℃以內(nèi)），200℃以上為±0.2℃。
檢測室：±0.1℃（室溫+5℃至200℃以內(nèi)），200℃以上為±0.2℃。
設定溫度與指示溫度之間的偏差不大于1℃。
閥配置系統(tǒng)
最多搭載8自動控制個閥，可自動序列運行(四通閥、六通閥、十通閥以及液體進樣閥可選)
可裝側(cè)閥箱、獨立小柱箱
輔助電子流路控制模塊（可壓力/流量控制模式）
零泄漏吹掃技術
高速切換電磁閥壽命長(100萬次，10mS)
檢測器技術指標
氫火焰離子化檢測器（FID）
檢測限：≤1.9pgC/s [n-C16]
基線噪聲：≤1PA
基線漂移：≤1PA/30min
線性范圍： ≥107(±10%)
數(shù)據(jù)采集頻率100Hz
