試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人白介素1α1α(IL-1α )ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human interleukin 1 alpha 1 alpha (IL-1 alpha) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11017 |
?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
心血管調(diào)節(jié)肽Salusin-α抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Salusin alpha
兔抗羊IgG抗血清 1mlRabbit anti-Goat IgG whole serum
辣根過氧化物酶標記的羊抗牛IgG 0.1mlGoat Anti-Bovine IgG/HRP
Alexa Fluor 555標記的兔抗羊IgM 0.1mlRabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 555
PE-Cy3標記的兔抗猴IgM 0.1mlRabbit Anti-Monkey IgM/PE-Cy3
FITC標記的兔抗馬IgM 0.1mlRabbit Anti-horse IgM/FITC
羅丹明標記的羊抗豚鼠IgG 0.3mlGoat Anti-Guinea pig IgG/RBITC
PE-Cy3標記的小鼠抗人IgG 0.1mlMouse Anti-human IgG/PE-Cy3
PE標記的小鼠抗大鼠IgG 0.1mlMouse Anti-rat IgG/PE
PE-Cy5.5標記的兔抗親和素 0.1mlRabbit Anti-Avidin/PE-Cy5.5
Alexa Fluor 555標記的兔抗雞IgM 0.1mlRabbit Anti-chicken IgM/Alexa Fluor 555
膠體金標記的兔抗豚鼠IgG 0.5mlRabbit Anti-Guinea pig IgG/Gold
生物素標記的兔抗人IgM 0.3mlRabbit Anti-human IgM/Bio
Alexa Fluor 488標記的兔抗猴IgM 0.1mlRabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 488
人白介素1α1α(IL-1α )ELISA檢測試劑盒100mL Percoll 2.0
100mL Ficoll-Paque介質(zhì) Ficoll-Paque 常溫保存
50次 細胞核微量制備試劑盒 Nuclei Miniprep Kit 常溫保存
15次 動物線粒體純化試劑盒 Animal Mitochondria Purification Kit 常溫保存
15次 植物線粒體純化試劑盒 Plant Mitochondria Purification Kit 常溫保存
15次 植物線粒體純化試劑盒 Plant Mitochondria Purification Kit 常溫保存
15次 植物葉綠體純化試劑盒 Plant Chloroplast Purification Kit 4℃保存
1mL 超快轉(zhuǎn)染試劑盒 Rapid Transfection Reagent 2-8℃保存
100次 阿爾瑪藍細胞增殖與細胞毒檢測試劑 Alamar Blue Cell Proliferation And Cytotoxicity -20℃避光保存
500次 阿爾瑪藍細胞增殖與細胞毒檢測試劑 Alamar Blue Cell Proliferation And Cytotoxicity -20℃避光保存
500次 MTT檢測試劑盒 MTT Assay Kit -20℃保存
5mL CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒 Cell Counting Kit-8 4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存兩年有效
100次 WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。