c-Met抑制劑（EMD-1214063）正在熱銷的產(chǎn)品：Beta-TG (Rabbit Beta-Thromboglobulin) ELISA Kit 兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白銻 CP,99.0%
NE (Rabbit neutrophil elastase) ELISA Kit 兔子中性粒彈性蛋白銻 ACS, ≥99%
C3a (Rabbit Complement fragment
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
英文名稱：EMD-1214063
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X11053
產(chǎn)品介紹:
EMD1214063是高活性c-Met選擇性抑制劑，IC50為4nM，比對IRAK4，TrkA，Axl，IRAK1和Mer的抑制性高200倍以上。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1100598-32-0 別名：Tepotinib 純度：99.80% 分子量：492.57 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
tong基移換mei樣蛋白1抗體 TKTL1
破傷風毒su重鏈抗體 Tetanus Toxin heavy chain
膜型絲氨suan蛋白mei2抗體 TMPRSS4
抑癌蛋白TCHP抗體 TCHP
T細胞急性淋巴細胞性白血病1蛋白/淋巴瘤蛋白5抗體 Tal1
胚胎干細胞相關(guān)蛋白TXNDC9抗體 TXNDC9
轉(zhuǎn)錄因子9抗體 TCF9
轉(zhuǎn)錄因子THOC2抗體 THOC2
轉(zhuǎn)移生長因子β3（TGFβ3）抗體 TGF beta 3
轉(zhuǎn)化生長因子β（TGFβ）抗體 TGF beta 1
胸腺suβ4抗體 Thymosin beta 4
轉(zhuǎn)化生長因子β2（TGFβ2）抗體 TGF beta 2
c-Met抑制劑（EMD-1214063）嗜熱棲熱 Rauvotetraphylline A
松杉靈芝 Pterisolic acid D
釀酒酵母 Pterisolic acid A
大腸埃希氏 Psidial A
Lonsdalea quercina subsp. quercina 土槿甲 D
葡萄白腐 Pierreione B
釀酒酵母 Periglaucine A
枯斑擬盤多毛孢 Onitisin 2'-O-glucoside
尖孢鐮刀亞麻專化型 Neorauflavane
嗜熱雙歧桿嗜熱亞種 Methyl dodonate A
嗜堿芽孢桿 Isotaxiresinol 9,9'-acetonide
側(cè)耳 Gopherenediol
庫爾勒芽孢桿 Farrerol 7-O-glucoside
葡萄座腔 Epipterosin L 2'-O-glucoside
白地霉 等效-6,9-二羥基-15-氧代-16-貝殼杉烯-19-
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
