Wortmannin(PI3K抑制劑)正在熱銷的產(chǎn)品：IL-1 Beta/FITC 熒光標(biāo)記白介1β抗體IgG二 standard for GC, ≥99.5% (GC)
IL-1ra/FITC 熒光標(biāo)記白介-1受體拮抗劑抗體IgG二丁 GCS, ≥99.5% (GC)
IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：Wortmannin 產(chǎn)品規(guī)格：0.5mg ：19545-26-7 分子量：428.43 儲存：-20℃，有效期12個月。 別名：KY 12420 描述：Wortmannin 是PI3K 抑制劑，IC50為3nM,抑制自噬體的形成，也有效抑制DNA-PK/ATM，IC50分別為16nM 和150nM. |
中文名稱：Wortmannin(PI3K抑制劑)
英文名稱：Wortmannin
產(chǎn)品規(guī)格：0.5mg
貨號：FS-X10233
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
滑菇熱休克蛋白β7抗體Human SPACA1 大鼠超敏熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒
缺陷短波單胞菌/鈉超化激活環(huán)核門控通道蛋白3抗體Human SPDYA 大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒
毛木耳鐵調(diào)節(jié)蛋白25抗體Human SPHK1 大鼠腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒
大腸桿菌HD域內(nèi)含蛋白2抗體Human CADM3(Cell adhesion molecule 3) 大鼠叉頭框蛋白P3(FoxP3)免疫試劑盒
聚生殼菌艾滋病病p55抗體Human SPHK1-Phospho-Ser225 大鼠層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)免疫試劑盒
芽孢桿菌造血激抗體Human SPHK2 大鼠層粘蛋白α1(LAMA1)免疫試劑盒
禾生HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白5B蛋白抗體Human SPI1 大鼠層連蛋白/板層(LN)免疫試劑盒
緊密帚枝霉缺氧誘導(dǎo)基因1B蛋白抗體Human SPATA1 大鼠不對稱二甲基精(ADMA)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌乙酰化組蛋白H4抗體Human SPATA13 大鼠補體因子H(CFH)免疫試劑盒
釀酒酵母熱休克蛋白B2抗體Human SPATA16 大鼠補體因子D(adipsin)(CFD)免疫試劑盒
根瘤菌人類白抗原B27Human SPAG4 大鼠補體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
草地阿格雷氏菌螺旋環(huán)螺旋轉(zhuǎn)錄因子HATH6抗體Human SOX5 大鼠補體片斷5(C5)免疫試劑盒
孢淡灰鏈霉菌神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1β2抗體Human SOX6( SRY-box 6) 大鼠補體片斷3a(C3a)免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌HDHD3蛋白抗體Human SOX8 大鼠補體片斷3(C3)免疫試劑盒
平田頭菇7-2HEATR3蛋白抗體Human SOX7 大鼠補體蛋白4(C4)免疫試劑盒
肉葡萄球菌（可訂）癌增強蛋白抗體Human SP100 大鼠補體蛋白3(C3)免疫試劑盒
魯氏不動桿菌Acinetobacter│lwoffii 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC)格列風(fēng)內(nèi)酯
叢毛紅曲菌Monascus│pilosus 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準品紫草
莫格球擬酵母Torulopsis│mogii 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準品,≥98.5%(GC)菝葜皂元
Wortmannin(PI3K抑制劑)黃孢紫紅菇 4-氟-3-基苯尼克酰磷核糖轉(zhuǎn)移
齊藤隱球酵母 三吡啶鈉環(huán)氧二十碳三烯
寡氧單胞 1,1,1-三氟異C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白4
蠟樣芽孢桿 三氟化-甲溶液KI67抗原
金針菇F39 3-吡啶去乙?；?/span>
根瘤 偏磷異檸檬脫氫2
紅色鹽顆粒形 環(huán)戊烷四羧巨病IgG抗體
籬邊粘褶 3-氨基-4,4,4-三氟巴豆乙酯白血病抑制因子
松鼠葡萄球松鼠亞種 2-氨基嘧啶鹽鹽賴氫吡啶啉
酮丁梭（酮丁桿） 鹽黃酮哌酯17α羥化
釀酒酵母 3,5-二-4-氨基苯乙酮20α羥化
黃綠木霉 5-(磺酰基)-2-氟P21蛋白
蘇云金芽孢桿 2-甲基丁酯膽固24S-羥化
蝙蝠蛾擬青霉 Cbz-L-谷 1-芐酯CD47分子
5#---3號(梨形灰包) 4-三氟甲硫基-1,2-苯二肌糖
