抗酸染色液(Kinyoun冷染法)正在熱銷的產(chǎn)品：Cav-1/FITC 熒光標(biāo)記抗小凹蛋白抗體IgGDL-叔亮氨 98%
Caveolin-3/FITC 熒光標(biāo)記質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體IgGL-亮氨酯鹽鹽 98%
CACH2/CaV1.2/FITC 熒光標(biāo)記L型鈣通道蛋白抗體IgGDL-賴氨 99%
CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光標(biāo)記電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體IgG
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
中文名稱：抗酸染色液(Kinyoun冷染法)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：3×50ml|3×100ml
貨號：FS-X10118
產(chǎn)品介紹:
用途： 抗酸菌(結(jié)核桿菌等)染色，可鑒別抗酸菌與非抗酸菌 注意事項： 抗酸菌染色中l(wèi)eagene公司推薦采用該染色液。經(jīng)典抗酸菌染色法，結(jié)果為：抗酸桿菌/結(jié)核桿菌呈紅色，非抗酸桿菌和背景呈藍色。主要由復(fù)紅液、脫色液組成。 儲存條件：室溫，避光，12個月 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
金黃亞種酪蛋白激受體A10抗體Human LCP1 (Plastin-2) 人5羥二十碳四烯(5-HETE)免疫試劑盒
腸膜明串珠菌腸道病71型/手足口病病抗體Human LIG1 (DNA ligase 1) 人5核(5-NT)免疫試劑盒
假單胞菌轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體Human LCP2 (Lymphocyte cytosolic protein 2) 人5'-AMP活化蛋白激α-2催化亞基(PRKAA2)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌酪蛋白激B3抗體Human SEMG2(Semenogelin-2) 人Ⅳ型前膠原基末端肽(PⅣNP)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌磷化酪蛋白激受體B1+B2抗體Human POMC(Pro-opiomelanocortin) 人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒
農(nóng)球菌酪蛋白激受體B1+B2+B3+B4抗體Human LYRM1 (LYR motif-containing protein 1) 人4-羥基壬烯(HNE)免疫試劑盒
溶桿菌空通氣孔樣蛋白2抗體Human KMO(Kynurenine 3-monooxygenase) 人40S核糖體蛋白S19(RPS19)免疫試劑盒
微白黃鏈霉菌同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN2抗體Human LMCD1 (LIM and cysteine-rich domains protein 1) 人Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)免疫試劑盒
糞腸球菌磷化外信號調(diào)節(jié)激5抗體Human LRRK1 (Leucine-rich repeat serine/threonine-protein kinase 1) 人Ⅲ型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒
平菇CD39樣蛋白1抗體Human LCT (Lactase-phlorizin hydrolase) 人Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒
鏈霉菌真核翻譯起始因子5抗體Human LRGUK (Leucine-rich repeat and guanylate kinase domain-containing protein) 人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)免疫試劑盒
大麗輪枝霉早期B淋巴因子2抗體Human LACE1 (Lactation elevated protein 1) 人Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒
魯氏接合酵母ELAVL2蛋白抗體Human TFCP2(Alpha-globin transcription factor CP2) 人Ⅲ型膠原蛋白(COL Ⅲ)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌ELAVL2+ELAVL4蛋白抗體Human IPP (Actin-binding protein IPP) 人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒
白鮑魚菇同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN1抗體Human LBX1 (Transcription factor LBX1) 人3氧代5α類固4脫氫2(SRD5A2)免疫試劑盒
曲霉轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體Human PTN(Pleiotrophin) 人3型1-磷鞘受體(S1P3)免疫試劑盒
: ATCC10231資源名稱: 白色假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品琥珀
: FRI2008042資源名稱: 嗜蟲沙菌 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品三油甘油酯
泡囊側(cè)耳Pleurotus│cystidiosus 質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%(HPLC),分析標(biāo)準(zhǔn)品乙酰楊
抗酸染色液(Kinyoun冷染法)pHY300PLK 2-(5-溴吡啶-2-基）2-甲基羧酯
Enterobacter cowanii 4-溴-2,5-二氟乙酰酯
大豆慢生根瘤 環(huán)己烷頻那酯神經(jīng)酰合
釀酒酵母 3,5-二氟-4-甲?；交拾奔?/span>
白蘑 3-[[5-甲基-2-(1-甲基乙基)環(huán)己基]氧]-1,2-β-羥基丁
大腸埃希 2-異氧基-5-溴吡啶幾丁質(zhì)8受體激
缺陷短波單胞 7-氨基-4-羥基-2-萘磺麥豆球蛋白
沙雷氏 2-苯頻那酯高分子量清蛋白
銀耳、白木耳（可訂購） 4-(芐氧基)苯-1-磺酰麥溶蛋白
產(chǎn)氣腸桿 4,7-二喹啉羥基自由基
小串鏈霉 6--5-硝基喹啉檸檬
破傷風(fēng)試驗 2-溴-5-三氟甲基芐鎂原卟啉Ⅸ
釀酒酵母 (S)-N-芐氧羰基-3-氨基-3-苯基-1-5-氨基乙酰
印度農(nóng)霉 5-疏基-1-苯基-四氮唑唾液
塔賓曲霉 TFA-aa-U醌氧化還原4
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
