操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Spautin-1 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | FS-X10650 |
產(chǎn)品介紹:
Spautin-1是特異的、強效的自噬抑制劑-1。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1262888-28-7 純度:99.02% 分子量:271.26 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
少孢哈薩克斯坦酵母Alexa Fluor 350標記的兔抗馬IgGAnti-TREX2 Antibody多型性腺瘤基因樣蛋白1(PLAGL1)
洋蔥伯克霍爾德氏菌Alexa Fluor 488標記的兔抗馬IgGAnti-TRIB2 Antibody(PB0946)多效調節(jié)因子1(PLRG1)
黑木耳Alexa Fluor 555標記的兔抗馬IgGAnti-TRIM28 Antibody(PB0848)多萜磷-N-乙?;咸烟橇邹D移1(DPAGT1)
橘黃裸傘Alexa Fluor 647標記的兔抗馬IgGAnti-TRIM24 Antibody多肽-N-乙酰基半乳糖轉移9(GALNT9)
小白菇PE-Cy5.5標記的兔抗馬IgGAnti-TRIM25 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D移8(GALNT8)
啤酒酵母PE-Cy7標記的兔抗馬IgGAnti-TRIM21 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D移7(GALNT7)
雜色曲霉堿性磷(AP)標記的兔抗馬IgGAnti-TRIM33 Antibody(PB0874)多肽-N-乙?;肴樘寝D移6(GALNT6)
灰葡萄孢(灰霉病菌)膠體金標記的兔抗馬IgGAnti-TRIM5 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D移5(GALNT5)
嗜熱鏈球菌FITC標記的兔抗馬IgGAnti-TRIO Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D移4(GALNT4)
Deinococcus羅丹明標記的兔抗馬IgGAnti-TRIM6 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D移3(GALNT3)
產(chǎn)黃青霉PE-CY5標記的兔抗馬IgGAnti-TRPA1/TSA Antibody多肽-N-乙酰基半乳糖轉移2(GALNT2)
魯氏接合酵母Cy3標記的兔抗馬IgGAnti-TRPC3 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D移14(GALNT14)
蘋果鏈格孢Cy5標記的兔抗馬IgGAnti-TRPC3 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D移13(GALNT13)
大腸埃希菌Cy5.5標記的兔抗馬IgGAnti-TRPC4 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D移12(GALNT12)
草青霉Cy7標記的兔抗馬IgGAnti-TRPC4 Antibody多肽-N-乙酰基半乳糖轉移11(GALNT11)
反硝化鹽單胞菌PE標記的兔抗馬IgGAnti-TRPC5 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D移10(GALNT10)
蛋白激Aγ抗體菩提奇異球菌人體腎癌組織源提取物
蛋白激受體相關1β抗體拜氏梭菌人體膽道癌組織提取物
過氧化活化增生受體γ2抗體干燥棒桿菌人體卵巢癌組織提取物
乳腺癌抑制基因Protor1抗體屎腸球菌(屎鏈球菌)小鼠大隱靜脈組織提取物
自噬抑制劑-1(Spautin-1)藻苔金黃桿 四化銥(IV) 水合物葡萄糖-6-磷
弱黃色粘球 化釔(III) 六水合物磷烯式酮羧激1
Pseudomonas argentinensis 化銥(III)磷烯式酮羧激2
小白孢枝瑚 三化鐵(III) 六水合物己糖激2
化鉺(III) 六水合物己糖激1
泡盛曲霉 化鏑(III)己糖激3
匍匐曲霉原變種 高鋅,六水6-磷葡萄糖脫氫
假絲酵母屬 硝鎘,四水糖原合成
猴頭菇 鋨 二水合物糖酵解相關磷果糖激
白僵 (R)-(+)-苯乙酮羧基
腸沙門氏腸亞種傷寒血清型 烯鹽鹽谷氨酰果糖-6-磷轉氨2
酵母屬 4-二苯并呋喃谷氨酰果糖-6-磷轉氨1
短密青霉 (S)-(-)-2, 2-雙(二對甲苯基膦)-1,1-二聯(lián)萘萊姆病IgG抗體
瑞氏假絲酵母 乙Ⅰ型膠原C端肽
木拉克酵母屬 維生A醋酯Ⅰ型膠原吡啶交聯(lián)終肽