mTOR激活劑(自噬抑制劑)正在熱銷的產(chǎn)品：VEGF/FITC 熒光標記VEGF抗體IgGFMOC-肌氨 98%
VEGF(Rabbit)/FITC 熒光標記血管內(nèi)皮生長因子抗體IgGN-FMOC-L-1,2,3,4-四羥異喹啉-3- 97%
VEGF-A/FITC 熒光標記血管內(nèi)皮生長因子A抗體IgGFMOC-N--L-氨 97%
VEGF-B/FITC 熒光標記血管內(nèi)皮生長因子B抗體I
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
中文名稱：mTOR激活劑(自噬抑制劑)
英文名稱：MHY1485
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號：FS-X10402
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：MHY1485 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg MHY1485是一種mTOR激活劑，也是一種自噬(autophagy)抑制劑。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：326914-06-1 純度：99.40% 分子量：387.39 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
華盛頓腥擲孢菌血小板衍化生長因子γ抗體Anti-AK2 Antibody(PB1089)存活抗體/生存蛋白(Surv)
運動發(fā)酵單孢菌（現(xiàn)1）血小板47蛋白抗體Anti-AKAP12 Antibody脆性組三聯(lián)體(FHIT)
虎掌菌*相關(guān)血漿蛋白A2抗體Anti-AK1 Antibody催乳誘導(dǎo)蛋白(PIP)
水鹽單胞菌屬血漿谷羧肽抗體Anti-AKR1C1/C2 Antibody催乳抑制激(PIH)
殼菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-AKR1B10 Antibody催乳釋放激(PRH)
弗吉尼亞鏈霉菌撲克蒙蛋白抗體Anti-AKR1B1 Antibody催乳(PRL)
粟酒裂殖酵母癌易感基因相關(guān)蛋白2Anti-AKR1D1 Antibody催產(chǎn)受體(OXTR)
多主葡萄殼菌細小清蛋白抗體Anti-AKR1D1 Antibody催產(chǎn)(OT)
灰葡萄孢（灰霉病菌）脂酰肌聚糖A抗體Anti-AKT1 Antibody促有絲分裂因子(MF/MPF)
Havobacterium原鈣粘蛋白11抗體Anti-AKR7A2 Antibody促胰液/胰泌(Secretin)
綠色木霉P選擇糖蛋白配體1抗體Anti-AKT2 Antibody(PB0006)促胰液/分泌受體(SR)
秸稈色假單胞菌蛋白激N2抗體Anti-AKT2 Antibody促胰液(secretin)
黃白側(cè)耳G蛋白偶合受體激2抗體Anti-Alas1 Antibody促性腺激釋放激(GnRH)
釀酒酵母早期發(fā)育調(diào)控蛋白2抗體Anti-ALDH1A1 Antibody促?；鞍?ASP)
克魯弗酵母磷酯Cβ3Anti-ALCAM Antibody促胃液受體(GsaR)
污黑腐皮殼血小板源性生長因子A抗體Anti-ALDH18A1 Antibody促睡眠肽(DSIP)
無害李斯特菌Listeria│innocua 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
乳桿菌屬Lactobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
斯魯菲亞紅酵母Rhodotorula│slooffiae 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
mTOR激活劑(自噬抑制劑)木耳(雪白林) 苯新戊烷乙二酯Bcl-2相關(guān)死亡促進因子
膠凍樣芽胞桿 3-聯(lián)苯磷化Bcl-2相關(guān)死亡促進因子
解脂亞羅酵母 4-聯(lián)苯葡萄糖
具黃曲霉 叔丁氧羰基-D-天冬 4-芐酯維生B3
解脂亞羅酵母 2-羥基-5-氟吡啶犬尿
擬康寧木霉 5-氟-2-甲氧基吡啶喹啉磷核糖基轉(zhuǎn)移
細鏈格孢 八甘維生B5
蘇云金芽孢桿莫里遜亞種 3,6-二噠-4-甲BCA蛋白
發(fā)酵畢赤酵母 4-芐基-4-羥基唾液
反硝化鹽單胞 Boc-Lys(Z)-pNA鈣調(diào)磷
雙孢蘑菇 1-Boc-L-氮雜環(huán)丁烷-2-羧Slingshot同源物
金針菇（毛柄、冬菇）) 6-溴喹喔啉鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激激
蘋果*（可換成cfcc 7946） (1,5-環(huán)辛二烯)二化釕(II)鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激1D
矩圓黑盤孢 (1,5-環(huán)辛二烯)化釕, 聚合物鈣調(diào)依賴蛋白激II
曲霉 2-羥基丁鈉單絲蛋白激1
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
