PI3K/mTOR/DNA-PK抑制劑(LY3023414)正在熱銷的產(chǎn)品：ADM R, Adrenomedullin receptor 腎上腺髓質(zhì)受體（抗原）2-噻吩 97%
VTG(vilogenin) 青鳉魚卵黃蛋白硫代草氨酯 95%
Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(CT) 凋亡蛋白活性因子-1（抗原）3-氧苯硫 98%
中文名稱：PI3K/mTOR/DNA-PK抑制劑(LY3023414)
英文名稱：LY3023414
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10474
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品價(jià)格：詢價(jià)LY3023414有效且選擇性地抑制PI3Kα,PI3Kβ,PI3Kδ,PI3Kγ,mTOR和DNA-PK，IC50分別為6.07nM，77.6nM，38nM，23.8nM，165nM和4.24nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1386874-06-1 純度：99.70% 分子量：406.48 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
林生蠟?zāi)⒘谆?/span>Rad51抗體Anti-EDA Antibody2(PRM2)
具核梭桿菌聚核亞種磷化成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體Anti-EDA Antibody釉原蛋白Y-連鎖(AMELY)
毛木耳（臺(tái)耳）磷化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體Anti-EDNRB Antibody釉原蛋白X-連鎖(AMELX)
藤倉鐮孢G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體Anti-EDNRB Antibody(PB0585)釉成熟蛋白(AMTN)
枯草芽孢桿菌環(huán)指蛋白1抗體Anti-EED Antibody誘導(dǎo)型一氧化氮合(NOS2)
糞腸球菌原癌基因c-Met相關(guān)酪激抗體Anti-EEA1 Antibody有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)
尿八疊球菌磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪激抗體Anti-EGF Antibody游離脂肪受體1(FFAR1)
類諾卡氏菌屬腫瘤血管內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白Robo4抗體Anti-EGF Antibody硬脂酰去飽和(SCD)
馬里斯棒狀桿菌軸突導(dǎo)向受體抗體Anti-EGF Antibody硬纖毛蛋白(STRC)
馬賽菌絡(luò)絲蛋白抗體Anti-EGF Antibody應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1(STIP1)
頭花革菌RUSC1抗體Anti-EGFR Antibody營養(yǎng)蛋白(TRO)
枯草芽胞桿菌RUSC2抗體Anti-EGFL6 Antibody隱花色2(CRY2)
釀酒酵母RAGEF2蛋白抗體Anti-EGFR Antibody隱花色1(CRY1)
釀酒酵母G蛋白偶聯(lián)受體RAB23抗體Anti-EGFR Antibody乙-N-甲基轉(zhuǎn)移(INMT)
山茶G蛋白信號調(diào)節(jié)因子14抗體Anti-EGFR Antibody陰離子/糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(AST)
油菜假單胞菌核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體/核因子kB受體活化因子抗體Anti-EGFR Antibody易位關(guān)聯(lián)膜蛋白1(TRAM1)
致病性大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
擬內(nèi)孢霉Endomycopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,可用于培養(yǎng)
莖點(diǎn)霉Phoma│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
PI3K/mTOR/DNA-PK抑制劑(LY3023414)小白菇 N-芐基托品酮色羥化
啤酒酵母 7-甲基-1,5-苯并二氧雜環(huán)庚烷-3-酮環(huán)氧二十碳三烯
雜色曲霉 2--5-苯甲二羥二十碳三烯
灰葡萄孢（灰霉?。?/span> 2--6-甲基-3-吡啶甲卵泡受體
嗜熱鏈球 L-天冬雙芐酯對甲苯磺鹽鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白IgG抗體
Deinococcus 噁唑鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白IgM抗體
產(chǎn)黃青霉 5-甲氧基-2-甲基-3-乙蛋白激R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激
魯氏接合酵母 4-溴-2-羥基苯金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1
蘋果鏈格孢 S-乙酰半胱鹽蛋腦啡肽
大腸埃希 十氫化萘-d18內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1
草青霉 N,N,N,N,-四環(huán)氧基-4，4-二氨基二苯微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白
反硝化鹽單胞 1-萘乙甲酯組H1受體
山茶 磷二氫-15N速激肽1
杭州弧 二-μ-雙[5--2-[(4-)(肟基)甲基]苯基]鈀(II)二聚體成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體
赫黃核鏈霉 戊二酰天冬酰內(nèi)肽
