Src/Abl抑制劑(Bosutinib)正在熱銷的產(chǎn)品：GH human 人生長因子硅四酯 99.99% metals basis
GRO human 人腫瘤生長相關(guān)因子硅四酯 >99%(GC)
HGH human 人生長激2-酰苯磺鈉 95%
HGF human 人肝生2-氧苯 98%
HMGB1 human 人高遷移率族蛋白環(huán)戊 99%
sICAM-1 human 人可溶性間粘附
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
英文名稱：Bosutinib
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號：FS-X10643
產(chǎn)品介紹:
Bosutinib是一種新型Src/Abl雙重抑制劑，在無細(xì)胞試驗中IC50分別為1.2 nM 和1nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：380843-75-4 別名：SKI-606 純度：99.83% 分子量：530.45 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
耐冷冷桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗雞IgGAnti-TNFRSF10A Antibody防御β127(DEFβ127)
大馬勃生物標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFAIP1 Antibody防御β126(DEFβ126)
巨型艾美耳球蟲Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFAIP8L2(TIPE-2) Antibody防御β125(DEFβ125)
玫瑰單胞菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF10B Antibody防御β124(DEFβ124)
鐮刀菌（大豆根腐病菌）Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF10B Antibody防御β123(DEFβ123)
蛹蟲草Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β121(DEFβ121)
乳桿菌屬PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β119(DEFβ119)
pAAV-RC5PE-Cy7標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β118(DEFβ118)
豬鏈球菌堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β116(DEFβ116)
布魯氏菌膠體金標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β115(DEFβ115)
產(chǎn)克雷伯氏菌辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11B Antibody防御β114(DEFβ114)
纖細(xì)海勒蒙氏菌FITC標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF13B Antibody防御β113(DEFβ113)
軟帕氏孔菌羅丹明標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF13C Antibody防御β112(DEFβ112)
毛地黃殼針孢Cy3標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF13C Antibody防御β110(DEFβ110)
楊奇青霉Cy5標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF14 Antibody防御β103B(DEFβ103B)
松口蘑Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF14 Antibody防御β103A(DEFβ103A)
蛋白激C亞型G抗體Hyphomonasrosenbergii人體結(jié)腸癌組織提取物
磷酯3蛋白抗體Ohtaekwangiakoreensis人體脂肪組織提取物
Rho鳥甘轉(zhuǎn)運蛋白抗體壞死梭桿菌壞死亞種人體表皮組織提取物
中心粒周蛋白抗體谷棒狀桿菌（黃色短桿菌）人體胎兒真皮組織提取物
Src/Abl抑制劑(Bosutinib)居巖牙殖球 鉻鋇α-淀粉
環(huán)柄菇 化亞金(I)胰蛋白
擬青霉 溴化金腺病
彩色豆馬勃 肉桂酰Ⅲ型膠原
釀酒酵母 (2-二環(huán)己基膦基-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯(lián)苯基)[2-(2-氨基乙基苯基)]鈀(II)腺病3型
釀酒酵母 硝鑭 六水合物腺病4型
多粘芽孢桿 三乙腺病5型
側(cè)耳 2-乙基N,N,N′,N′-四異基亞磷酰二雄甾烯酮；雄烯酮
匍枝根霉(黑根霉) 2-溴-5-(三氟甲基)苯甲腺病1型
多毛孢 2-烯基-4,6-聯(lián)苯甲酰間苯二胰多肽
香榧嗜藍(lán)孢孔 亞硫鈣支原體
杉葉散斑殼 5-尿支原體抗體
沃克曼枸櫞桿 3,4-二苯痘抗體
單增李斯特* 5-甲氧基-3-羧抗繆勒氏管
綠色木霉=木木霉 5-甲基-2-羧II型膠原蛋白
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
