RAR/RXR核受體激動(dòng)劑正在熱銷的產(chǎn)品：Phospho-Raptor (Ser792) /FITC 熒光標(biāo)記化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgG[Val5]-Angiotensin II acetate salt hydrate ≥97% (HPLC)
RASSF1A/FITC 熒光標(biāo)記Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體IgGActivity-Dependent Neuroprotective Prot
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱：RAR/RXR核受體激動(dòng)劑
英文名稱：Retinoic acid
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|500mg|1g|5g
貨號(hào)：FS-X10345
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：Retinoic acid 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|500mg|1g|5g Retinoic acid是一種天然的RAR/RXR核受體激動(dòng)劑。Retinoic acid也結(jié)合到PPARβ/δ，Kd為17nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：302-79-4 別名：ATRA;Tretinoin;Vitamin A acid;all-trans-Retinoic acid 純度：98.36% 分子量：300.44 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
棒彎孢線粒體融合蛋白1抗體Human MDH1 離子胞內(nèi)通道蛋白4(CLIC4)
白腐菌O6甲基鳥DNA甲基轉(zhuǎn)移抗體Human ALDH1A1(Retinal dehydrogenase 1) 卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)
炭疽盤孢菌肌肉骨骼受體酪激抗體Human MDMX 卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)
仁果叢梗孢結(jié)核分枝桿菌抗體Human MDM2 卵泡抑樣蛋白1(FSTL-1)
枯草芽孢桿菌膜相關(guān)環(huán)指蛋白1抗體Human MED15 卵泡抑(FS)
冷海希瓦氏菌膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體Human MED17 膽固?；D(zhuǎn)移(LCAT)
費(fèi)氏中華根瘤菌膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體Human SLIT2(Slit homolog 2 protein) 卵巢癌抗原X1(OVX1)
肉座菌屬膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體Human MCCC1 硫氧化還原蛋白(Trx)
大黃歐文氏菌膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體Human MCCC2 硫氧還蛋白域包含蛋白6(TXNDC6)
沙漠畢赤酵母膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體Human MCEE 硫氧還蛋白還原(TrxR)
粗柄白蘑激-M2Human MCM10 硫乙酰肝蛋白多糖2(HSPG2)
扣囊復(fù)膜孢酵母間皮抗體Human MCM3(Minichromosome maintenance complex component 3) 硫褪黑色(MS)
巴氏醋桿菌基質(zhì)金屬蛋白-1抗體Human MCM8 硫軟骨蛋白聚糖5(CSPG5)
微球菌基質(zhì)金屬蛋白-1抗體Human MCM-BP 硫軟骨N-乙酰半乳糖基轉(zhuǎn)移1(CSGALNACT1)
美澳型核果褐腐病菌基質(zhì)金屬蛋白13抗體Human MCM4 硫軟骨(CS)
考克氏菌基質(zhì)金屬蛋白-14抗體Human MCRS1 硫皮膚－硫軟骨PG(DSCSPG)
嗜冷海桿菌Marinobacter│psychrophilus 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR羊藿
: F263資源名稱: 曲霉 質(zhì)量規(guī)格：>98%延胡索乙
嗜熱脂肪地芽抱桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質(zhì)量規(guī)格：>99%,粒徑20nm對(duì)香豆
RAR/RXR核受體激動(dòng)劑球孢白僵 雄烯二酮肌糖α
黃色籃狀 Boc-L-炔基甘基質(zhì)金屬蛋白1
交角耳 BOC-D-炔基甘基質(zhì)金屬蛋白13
木耳 L--叔亮甲酯鹽鹽基質(zhì)金屬蛋白14
葉點(diǎn)霉 3-溴-5-硝基三氟甲苯基質(zhì)金屬蛋白2
玫煙色棒束孢 三十六烷基質(zhì)金屬蛋白26
枯草芽孢桿 二十九烷基質(zhì)金屬蛋白3
樟疫霉 二十六烷基質(zhì)金屬蛋白4
平菇 4,6-二-2-甲硫基嘧啶基質(zhì)金屬蛋白8
熒光假單胞 6-氨基喹喔啉基質(zhì)金屬蛋白9
鹽水海桿狀 二(β-D-木糖)基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1
毛殼 N-Boc-L-叔亮基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2
豬丹絲 1-溴-6-己烷基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3
禽分枝桿 環(huán)丁基鹽鹽基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4
彎曲乳桿（更名類干酪乳桿） 1,6-二己烷基質(zhì)衍生因子1
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
