操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Motesanib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | FS-X10827 |
產(chǎn)品介紹:
Motesanib是一種有效的VEGFR1/2/3的ATP競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑,IC50值為2nM/3nM/6nM,與對(duì)Kit的選擇性相似,是PDGFR和Ret的10倍多。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):453562-69-1 別名:AMG 706; 純度:99.93% 分子量:373.45 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
海洋伍斯菌大鼠Anti-OR5K3 Antibody人酪羥化(TH)
淡紫褐鏈霉菌大鼠卵清蛋白特異性IgEAnti-OR5M11 Antibody人酪羥化(TH)
七角井鹽單胞菌小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子3Anti-OR5M3 Antibody人多巴脫羧(DDC)
靈芝人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Anti-OR5M9 Antibody人多巴脫羧(DDC)
果生鏈核盤菌人CD30分子Anti-OR5T3 Antibody人非神經(jīng)元性烯化(NNE)
德里腐霉大鼠C型鈉尿肽Anti-OR5V1 Antibody人非神經(jīng)元性烯化(NNE)
曲霉小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子4Anti-OR5P2 Antibody人多巴-β羥化(DBH)
根瘤菌大鼠αS轉(zhuǎn)移Anti-OR6A2 Antibody人多巴-β羥化(DBH)
牛布氏菌陽性血清國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品(補(bǔ)體結(jié)合)小鼠骨保護(hù)Anti-OR6C2 Antibody人乙?;?CHAc)
釀酒酵母人CXC趨化因子受體1Anti-OR6B2 Antibody人乙?;?CHAc)
葡萄座腔菌人XC趨化因子受體1Anti-OR5W2 Antibody人異檸檬脫氫(ICD)
金黃殼囊孢菌小鼠B因子Anti-OR6C3 Antibody人異檸檬脫氫(ICD)
葡萄黑腐大鼠同型半胱Anti-OR6C68 Antibody人原Ⅱ(Try-Ⅱ)
皺褶莫氏黑粉菌小鼠抑瘤MAnti-OR6C70 Antibody人原Ⅱ(Try-Ⅱ)
枯草芽孢桿菌大鼠糖皮質(zhì)激受體βAnti-OR6C68 Antibody人腺脫(ADA)
雙氮纖維單胞菌人二級(jí)淋巴組織趨化因子Anti-OR6C70 Antibody人腺脫(ADA)
Ras特異性鳥核釋放因子1弗吉尼亞鏈霉菌615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株
mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體#意大利青霉615小鼠肺癌瘤株
核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體#梨生囊殼孢615小鼠滑膜肉瘤瘤株
轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體#大葉黃楊瘡痂病615小鼠乳腺癌瘤株
VEGFR1/VEGFR2/VEGFR3抑制劑(Motesanib)宛氏擬青霉 羊鏈球培養(yǎng)基半胱蛋白3
根瘤 沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)氨基轉(zhuǎn)移
殺鮭氣單胞日本鮭亞種 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(USP)層粘連蛋白
緋紅密孔(不到這個(gè)種) 硫乙鹽流體培養(yǎng)基叉頭框蛋白O3
大腸埃希氏桿 膽鹽乳糖培養(yǎng)基(05藥典)蛋白激B
釀酒酵母 乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基肝生長(zhǎng)因子
枯草芽孢桿 曙紅亞甲基藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基(EMB)核心蛋白聚糖
長(zhǎng)枝木霉 四硫磺鈉亮綠培養(yǎng)基(TTB)肌球蛋白重鏈
氏假單胞 沙門、志賀屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)雷帕霉靶蛋白
小孢根霉原變種 溴化十六烷基三瓊脂培養(yǎng)基磷化腺活化蛋白激
紅色紅曲霉 哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基(新藥典)球蛋白A
食砜節(jié)桿 假單胞瓊脂培養(yǎng)基P球蛋白G
高盧蜜環(huán) 液體乳糖培養(yǎng)基母親DDP同源物2
凍土毛霉凍土變型 液體鹽胱培養(yǎng)基皮質(zhì)
雙孢小雙孢 連四硫鹽培養(yǎng)基神經(jīng)肽Y