MMPs抑制劑(Marimastat)正在熱銷的產品：GsaR(Human gastrin receptor) ELISA Kit 人促胃液受體瓊脂 BR
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培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱：MMPs抑制劑(Marimastat)
英文名稱：Marimastat
產品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg
貨號：FS-X10738
產品介紹:
Marimastat是一種廣譜的MMPs抑制劑，作用于MMP-9，MMP-1，MMP-2，MMP-14和MMP-7，IC50值分別為3，5，6，9和13nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：154039-60-8 別名：BB2516;TA2516 純度：95.65% 分子量：331.41 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
叢毛紅曲霉BTG2（抗原）Anti-ESPL1 Antibody人TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)
香蕉原癌基因蛋白（活化蛋白1）（抗原）Anti-ERN2 Antibody人TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)
金耳周期D1（抗原）Anti-ETNK2 Antibody人腫瘤血管生長因子(TAF)
莫哈韋芽孢桿菌β-酪蛋白(抗原)Anti-ESET Antibody人腫瘤血管生長因子(TAF)
假單胞菌膽囊收縮/縮膽囊(八肽)Anti-ETS1 Antibody人角蛋白20(CK-20)
黃綠綠僵菌*CD4(抗原)Anti-ETV4 Antibody人角蛋白20(CK-20)
三葉草根瘤菌CD4抗原Anti-EXO1 Antibody人角蛋白19(CK-19)
Acinetobacter soliCD8抗原Anti-EXOG Antibody人角蛋白19(CK-19)
少根根霉原變種CD20（抗原）Anti-ETV6 Antibody人角蛋白18(CK-18)
異常漢遜酵母CD25/白介2-受體(抗原)Anti-EZH2 Antibody人角蛋白18(CK-18)
野牡丹尼爾氏酵母血小板內皮黏附分子-1（抗原）Anti-F2RL2 Antibody人嗜鉻蛋白A(CgA)
球孢白僵菌CD34(多肽抗原)Anti-F10 Antibody人嗜鉻蛋白A(CgA)
大腸桿菌神經粘附分子1(抗原)Anti-EZR Antibody人視網膜母瘤抑制蛋白(pRB)
芽孢桿菌癌胚抗原相關粘附分子8Anti-F12 Antibody人視網膜母瘤抑制蛋白(pRB)
黑曲霉CD68抗原Anti-F13B Antibody人生長調節(jié)致癌基因α/黑瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)
佛雷德里克斯堡假單胞菌干生長因子受體/表面分化抗原（抗原）Anti-F9 Antibody人生長調節(jié)致癌基因α/黑瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)
新型分泌細胞表面蛋白/成骨細胞相關蛋白SCUBE3抗體孢囊桿菌人單核細胞白血病
內皮分泌蛋白SCUBE2抗體弱小珊瑚桿菌人原髓細胞白血病細胞
清道夫受體STAB2抗體黃色粘球菌人原位胰腺腺癌細胞
維甲誘導蛋白6抗體產堿假單胞菌小鼠淋巴樣瘤細胞
MMPs抑制劑(Marimastat)白令海芽孢桿 N-芐基酮葡萄糖-6-磷
梨生囊孢殼 (3-溴基)三苯基溴化膦葡萄糖-6-磷脫氫
美澳型核果褐腐病 1,3-二氨基胍鹽鹽羥甲基戊二單酰
地衣芽孢桿 菁綠羥甲基戊二單酰合成
親和鏈霉 苯氧乙鈉羥脯
絲膜屬 9,10-二氫-9-氧雜-10-磷雜菲-10-氧化物乳脫氫
氧化亞鐵硫桿（暫不提供） BOC-L-精鹽鹽乳鐵蛋白
微白諾卡氏 芐基甲基生長
芽孢桿 Tiglyl Glycine褪黑
片球屬 三氟磺酐維生K1
Laceyella 2-甲基噻唑纖溶原激活物抑制因子1
豬鏈球 4-辛基雄
彎孢 鉻變FB血漿α顆粒膜蛋白
大腸埃希 五氟酐胰島
庫爾勒海洋桿 膽固硬脂酯胰島樣生長因子1
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
