HDAC6抑制劑（Tubastatin A鹽酸鹽）正在熱銷的產(chǎn)品：Human matrilysin,MAT ELISA Kit 人質(zhì)裂解蛋白/質(zhì)溶木糖 99%
Human triple-helical peptide,THP ELISA Kit 人螺旋肽D-木糖 98%
Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 EL
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
中文名稱：HDAC6抑制劑（Tubastatin A鹽酸鹽）
英文名稱：Tubastatin-A
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號：FS-X10891
產(chǎn)品介紹:
Tubastatin A鹽酸鹽是HDAC6選擇性抑制劑，IC50為15nM，比對其它亞型的抑制性高1000倍(相對HDAC8是57倍)。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1252003-15-8 純度：99.05% 分子量：335.4 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
蘇云金芽孢桿菌大鼠干因子受體Anti-SSBP1 Antibody人凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)
綠色木霉大鼠基質(zhì)衍生因子1βAnti-SSBP2 Antibody人抗凝血受體(ATR)
茶樹菇人落葉型天皰瘡抗體Anti-SSTR4 Antibody人抗凝血受體(ATR)
大腸埃希菌人β2糖蛋白1抗體IgAAnti-SSX1 Antibody人凝血受體(TR)
孢小克銀漢霉大鼠血管生成受體Tie1Anti-SSH3 Antibody人凝血受體(TR)
地衣芽孢桿菌大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激2Anti-ST18/Znf387 Antibody人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)
山茶盤孢人抗心磷脂抗體IgAAnti-SSH3 Antibody人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)
枯草芽孢桿菌枯草亞種大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2Anti-ST3GAL3 Antibody人血纖蛋白原(Fbg)
淡紫擬青霉人β2糖蛋白1抗體IgMAnti-STAC2 Antibody人血纖蛋白原(Fbg)
耐堿放線孢菌人β2糖蛋白1抗體IgGAnti-ST6GAL1 Antibody人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)
Bacillus tequilensis大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3Anti-STARD Antibody人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)
粟酒裂殖酵母大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4Anti-STARD13 Antibody人抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)
黑曲霉人抗心磷脂抗體IgMAnti-STEAP2 Antibody人抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)
乙鈣不動桿菌人抗心磷脂抗體IgGAnti-STEAP4 Antibody人血栓前體蛋白(TpP)
大腸埃希氏菌大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體ⅠAnti-STARD13 Antibody人血栓前體蛋白(TpP)
產(chǎn)短桿菌人抗高爾基體抗體Anti-STEAP3 Antibody人淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)
甲狀腺激反應(yīng)蛋白抗體天麻蜜環(huán)菌（京-234）抗P24蛋白單抗7
跨膜蛋白49抗體茯苓578抗人大腸癌單抗7
腫瘤/睪丸抗原20抗體黑木耳(東A-3)抗人微管蛋白-alpha單抗7
腫瘤蛋白D54蛋白抗體散囊菌抗人醛羧A單抗7
HDAC6抑制劑（Tubastatin A鹽酸鹽）釀酒酵母 5--8-羥基-7-喹啉磷化酪激
山夫頓堡沙門氏 鈦/Ti酮氧化
匍匐曲霉原變種 碲/Te胰島受體α
大杯香菇 鉭/Ta囊尾蚴抗體
解脂假絲酵母 鍶/Sr高致病性藍耳病抗體
解淀粉芽孢桿 錫/Sn超氧化物歧化
Rathayibacter caricis 硅根/SiO32-脂質(zhì)運載蛋白-2
棒黃曲霉 二氧化硅/SiO2過氧化6
靈芝 硅/SiN-乙酰-β-D-氨基葡萄糖
雞腿菇cc968 硒/Se總蛋白
越桔假絲酵母 鈧/ScS0鈣結(jié)合蛋白A9
黑曲霉 銻/Sb可溶性Endoglin
釀酒酵母 1-(4-基苯基)-3-甲基-5-吡唑酮(4CMP)可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1
匍匐曲霉原變種 銻/Sb
靈芝屬 5--8-羥基喹啉還原
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
