公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | TE-11人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞 | 貨號(hào) | AXB6742 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | TE11:TE-11 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹:
別稱 | TE11 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬(wàn) 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過(guò)度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過(guò)夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過(guò)大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IL-16(Mouse Interleukin 16) ELISA Kit 小鼠白介素16Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CCL28/FITC 熒光素標(biāo)記粘膜相關(guān)上皮趨化因子MEC抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EDG4/LPA2 溶血0脂酸受體蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
Tn-T (Rat Troponin T,Tn-T )ELISA Kit 大鼠肌鈣蛋白T 96T
MOBKL2B 英文名稱: Mob1同源蛋白MOBKL2B抗體 0.2ml
ASCL2 英文名稱: ASCL2蛋白抗體 0.2ml
Anti-CCL28/FITC 熒光素標(biāo)記粘膜相關(guān)上皮趨化因子MEC抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AGEs(Mouse advanced glycation end products) ELISA Kit 小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CCL5/RANTES/FITC 熒光素標(biāo)記調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的因子IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EGF 表皮生長(zhǎng)因子抗體(大鼠) 規(guī)格 0.1ml
c (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 兔心肌特異性肌鈣蛋白T 96T
MNX1 英文名稱: 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元及胰腺同源蛋白1抗體 0.2ml
ATPIF1 英文名稱: ATPIF1蛋白抗體 0.2ml
Anti-CCL5/RANTES/FITC 熒光素標(biāo)記調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的因子IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HO-1(Mouse heme oxygenase 1) ELISA Kit 小鼠血紅素氧合酶1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD158i/KIR2DS4/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DS4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
HBsAb(立可讀) 乙型肝炎表面抗體 96T
MNS1 英文名稱: 減數(shù)分裂特異核結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 0.2ml
ABLIM1 英文名稱: 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
Anti-CD158i/KIR2DS4/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DS4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-5 ELISA Kit 大鼠白介素5Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-AIF/FITC 熒光素標(biāo)記調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FBXO11 F-box蛋白相關(guān)蛋白11抗體 規(guī)格 0.2ml
HBeAb(Mouse hepatitis B virus e antibody) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎e抗體 96T
MND1 英文名稱: 減數(shù)分裂核分裂蛋白1抗體 0.2ml
AASDHPPT 英文名稱: 基乙二酸半醛脫氫酶0酸泛酰巰基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
TE-11人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞Anti-AIF/FITC 熒光素標(biāo)記調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
5-HT(Mouse 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 小鼠5羥色胺Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD67/CEAcam8/FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPP6 二肽基肽酶6抗體 規(guī)格 0.2ml
RV IgM 風(fēng)疹病毒 IgM(捕獲法一步法)
MNAT1 英文名稱: 細(xì)胞周期G1的相互作用蛋白抗體 0.2ml
ASTN2 英文名稱: 星形肌動(dòng)蛋白抗體 0.2ml
Anti-CD67/CEAcam8/FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml