WNT抑制劑(Pyrvinium pamoate)正在熱銷的產(chǎn)品：Human cyclophilin A,CyPA ELISA Kit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)A順二酐 CP，98.5%
Human dystrophin ELISA Kit 人肌養(yǎng)蛋白輔Q 98%
Human Collectin ELISA Kit 人膠原凝集5-羥色氨 99%
Human chaperonin ,CPN ELI
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱：WNT抑制劑(Pyrvinium pamoate)
英文名稱：Pyrvinium pamoate
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10890
產(chǎn)品介紹:
Pyrvinium pamoate是一種有效驅(qū)蟲劑，也是WNT有效抑制劑。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：3546-41-6 別名：Pyrvinium embonate 純度：98.0% 分子量：575.7 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
南假單胞菌人髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgGAnti-SRPK1 Antibody人過敏/補體片斷4(C4a)
新疆鹽地桿菌人抗蛋白3抗體IgGAnti-SPTBN5 Antibody人補體片斷5a(C5a)
凝結(jié)芽胞桿菌大鼠B因子Anti-SPTBN1 Antibody人補體片斷5a(C5a)
印度洋斯塔普氏菌大鼠抑瘤MAnti-SRCIN1 Antibody人補體片斷3a(C3a)
大腸桿菌人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgAAnti-SRSF11 Antibody人補體片斷3a(C3a)
毛柄金錢菌(金針菇)人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體Anti-SRSF11 Antibody人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)
嗜糞細薄菌大鼠胎盤生長因子Anti-SRSF3 Antibody人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)
蘇云金芽孢桿菌九州亞種人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體Anti-SRSF4 Antibody人Ⅸ(FⅨ)
擴展鐮孢大鼠正常T表達和分泌因子Anti-SS18 Antibody人Ⅸ(FⅨ)
根瘤菌人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體Anti-SRSF5 Antibody人Ⅹ(FⅩ)
苦白蹄大鼠L解Anti-SRY Antibody人Ⅹ(FⅩ)
福氏志賀氏菌人抗核小體抗體IgGAnti-SRSF4 Antibody人血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)
黃曲霉大鼠可溶性CD30配體Anti-SRSF7 Antibody人血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)
運動節(jié)桿菌人抗硬皮病抗體70Anti-SRSF7 Antibody人纖溶抗纖溶復合物(PAP)
賴芽孢桿菌大鼠可溶性CD40配體Anti-SS18 Antibody人纖溶抗纖溶復合物(PAP)
潮汐科維爾氏菌人抗SS-B/La抗體Anti-SSBP1 Antibody人凝血抗凝血復合物(TAT)
轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α抗體奧氏蜜環(huán)菌2E8A5
星形細胞瘤高表達蛋白抗體環(huán)指蛋白0紅緣擬層孔菌4B14A1
線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位抗體尖鐮孢 黃瓜?；?/span>Jurkat-LTRGT
前列腺癌和結(jié)腸癌相關(guān)蛋白猴頭菇whiov-P24C-MoAb
WNT抑制劑(Pyrvinium pamoate)硫磺 硫根(硫鹽)/SO42-還原型輔Ⅰ；煙酰腺二核
釀酒酵母 硝根(硝鹽)/NO3-氧化型輔Ⅰ
芬芳鐮刀 四[N-鄰苯二甲酰-(S)-苯]二銠乙乙酯加合物酮氧化
蠟狀芽孢桿 氟離子(氟化物)/F-鼠相關(guān)蛋白
假單胞屬 5-硝基-2-甲神經(jīng)肽Y
大腸桿 離子(化物)/Cl-促黑皮質(zhì)原
尖孢鐮孢 鋯/Zr瘟病E0蛋白抗體
植物乳桿 蒽醌-2-磺鈉鹽一氧化氮合運輸因子
土曲霉 鋅/Zn二肽
粘質(zhì)沙雷氏 鎢/W淀粉
蠟狀芽孢桿 帕莫羧肽A
釀酒酵母 2,2-雙[4-(4-氨基苯氧基)苯基]烷白三烯B4
美澳型核果褐腐病 釩/V分泌型磷脂A2
Fibrella 4,4'-雙(4-氨苯氧基)聯(lián)大腸桿K99抗體
鯉鏈霉 /Tl心肌肌鈣蛋白T
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
