操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
RepSox | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | FS-X10488 |
產(chǎn)品介紹:
英文名稱:RepSox 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg RepSox是一種有效的選擇性的TGFβR-1/ALK5抑制劑,抑制ALK5自磷酸化,IC50為4nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:446859-33-2 別名:E-616452;SJN 2511 純度:99.94% 分子量:287.32 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
毛柄金錢菌(金針菇)磷化淋巴胞漿蛋白2抗體Anti-Fibronectin(FN1) Antibody血管活性腸肽受體1(VIPR1)
草木樨中華根瘤菌磷化淋巴胞漿蛋白2抗體Anti-FKBP1(FKBP1A) Antibody血管非炎性蛋白3(VNN3)
粉狀畢赤酵母信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子7抗體Anti-FIS1 Antibody血管非炎性蛋白2(VNN2)
香菇信號轉(zhuǎn)導(dǎo)接頭蛋白2抗體Anti-FLCN Antibody血管非炎性蛋白1(VNN1)
中華耐冷黃桿菌SLAP蛋白抗體Anti-FLG Antibody旋轉(zhuǎn)蛋白(RTTN)
青紫黑鏈霉菌固攜帶蛋白2抗體Anti-FLI1 Antibody旋光蛋白(OPTC)
枯草芽孢桿菌信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體Anti-FLI1 Antibody序列相似家族5成員C(FAM5C)
雜色曲霉碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體Anti-FLOT2 Antibody序列相似家族3成員B(FAM3B)
黑根毛霉SHISA蛋白家族9抗體Anti-FLNA Antibody序列相似家族20成員A(FAM20A)
珞珈山鏈霉菌凋亡抑制因子抗體Anti-FLOT1 Antibody序列相似家族132成員A(FAM132A)
藻渣膨脹芽孢桿菌外紡錘體樣蛋白1抗體Anti-Flotillin 2(FLOT2) Antibody嗅4(OLFM4)
根瘤菌磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體Anti-FLT1 Antibody嗅3(OLFM3)
解肝磷脂土地桿菌抗表面S蛋白抗體Anti-FLT1 Antibody嗅2(OLFM2)
粘肉齒耳突觸抗體/突觸相關(guān)蛋白-1Anti-FLT1 Antibody嗅1(OLFM1)
釀酒酵母分泌抗體Anti-FLT1 Antibody嗅蛋白(Olfactorin)
香菇可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白22A17抗體Anti-FLT1 Antibody休眠蛋白(RSN)
神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白18抗體谷棒桿菌Ⅲ型HL-7702(L-02)人肝正常細(xì)胞
絲棕櫚酰轉(zhuǎn)移1抗體蜜蜂生球擬酵母MRC-5人胚肺成纖維細(xì)胞
脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5抗體球擬酵母屬NCI-H1650人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
分揀微管連接蛋白抗體葡萄汁酵母NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞
TGFβR-1和ALK5抑制劑(RepSox)單胞 納氮化鈦單核趨化蛋白2
貝氏不動桿 S-(1-氧代-2-吡啶基)-N,N,N′,N′-四甲基硫脲四氟鹽凋亡蛋白激活因子1
劉志恒氏 5-氟-2-苯CD31分子
青霉?fàn)钫持忝?/span> 二乙氧基二苯基硅烷抗性磷5b
海芋平臍蠕孢 1-乙?;?4-甲抗堿性磷5b
豬丹絲 (溴甲基)環(huán)己烷β-羥丁脫氫
Paenibacillus N-基三乙氧基硅烷線粒體羥甲基戊二單酰合2
Acinetobacter pittii Nemec et al. 2--4-(三氟甲基)苯3-琥珀酰轉(zhuǎn)移1
玫瑰單胞屬 4-烯氧基-2-羥基二苯甲酮乙酰乙?;D(zhuǎn)移1
旋枝霉 (R)-(+)-2-苯甘氨乙酰乙酰基轉(zhuǎn)移1
海泥黃桿 3-羧基苯線粒體羥甲基戊二單酰合2
德氏鏈霉 羰基乙酰酮(三苯基磷基)銠(I)酪
腐皮鐮孢 4--3-氟吡啶GDNF家族受體a樣蛋白
夏威夷平臍蠕孢 3-氨基-4-甲基三氟甲苯非羧化骨鈣
Chryseobacterium vietnamense Boc-L-beta-谷 5-芐酯3-羥基3-甲基戊二酰還原