PRMT5酶活性抑制劑(EPZ015666)正在熱銷的產(chǎn)品：Fe65 protein peptide Fe65 蛋白（多肽抗原）苯 色標(biāo)standard for GC ,>99.5% (GC)
FGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝結(jié)合生長因子(性成纖維生長因子）（多肽片斷抗原）苯 98%
ECG2 (sophagus cancer-related gene-2)
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：EPZ015666 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg EPZ015666是一種有效的PRMT5酶活性抑制劑，IC50為22nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1616391-65-1 純度：98.56% 分子量：383.44 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
英文名稱：EPZ015666
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
貨號：FS-X10485
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
中國克魯維酵母淋巴管內(nèi)皮和血管內(nèi)皮受體1抗體Anti-Ferritin Antibody血栓烷受體(TP)
露濕漆斑菌鞭毛蛋白2抗體Anti-FES Antibody血栓A2(TXA2)
硬結(jié)節(jié)桿菌跨膜蛋白SEMA5A抗體Anti-FFAR1 Antibody血色病蛋白(HFE)
香菇IQCJ抗體Anti-FGA Antibody血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)
糞腸球菌*SH2結(jié)構(gòu)域蛋白C3抗體Anti-FGA Antibody血清淀粉樣P物質(zhì)(SAP)
日本色鹽桿菌2型豬鏈球菌溶血抗體Anti-FGB Antibody血漿過氧化物(GPX3)
解鳥克雷伯菌肺表面活性蛋白A抗體Anti-FGF1 Antibody血紅氧合2(HO2)
綠色鏈霉菌肺表面活性蛋白A抗體Anti-FGF1 Antibody血紅氧合1(HO1)
多粘類芽孢桿菌葡萄糖-6磷轉(zhuǎn)運蛋白抗體Anti-FGF1 Antibody血紅結(jié)合蛋白(HPX)
枯草芽孢桿菌線粒體琥珀脫氫D抗體Anti-FGF1 Antibody血紅蛋白μ(HBμ)
叢毛紅曲類固硫酯抗體Anti-FGF10 Antibody血紅蛋白θ1(HBθ1)
腐質(zhì)霉固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白抗體Anti-FGF10 Antibody血紅蛋白ζ(HBζ)
傘枝犁頭霉轉(zhuǎn)運蛋白家族39成員7抗體Anti-FGF13 Antibody血紅蛋白ε1(HBε1)
迪吉氏黃桿菌碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4突變型抗體Anti-Fgf19(Fgf15) Antibody血紅蛋白δ(HBδ)
木賊鐮刀菌磷化認(rèn)知缺陷突觸相關(guān)蛋白SynGAP抗體Anti-FGF19 Antibody血紅蛋白γ2(HBγ2)
Sphingobium fuliginis Syndecan 3蛋白抗體Anti-FGF19 Antibody血紅蛋白γ1(HBγ1)
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體空腸彎曲菌hFoB1.19:SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白5抗體液化MGC80-3人胃癌細(xì)胞
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白6抗體黑曲霉 ACHN人腎癌細(xì)胞
SLAMF6抗體淺白隱球酵母3T3-L1小鼠脂肪細(xì)胞
PRMT5酶活性抑制劑(EPZ015666)豬瘟病間接抗體 3,5-二羥基苯甲核磷化
細(xì)麗擬盤多毛孢 六甘縮
釀酒酵母 3--2-氟磺脲類藥物受體
花楸盤多毛孢 5-甲氧基水楊轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4
果生鏈核盤 BOC-L-2-溴苯山梨脫氫
厄氏 N-乙基-2-氨甲基吡咯烷肌分化因子
核盤 Otilonium Bromide生肌因子5
枯草芽孢桿 L-(-)-α-氨基-ε-己內(nèi)酰鹽鹽神經(jīng)鞘磷脂
金黃色葡萄球 聚二烯二甲基化溶液核糖核A
伯頓生絲畢赤酵母 聚二烯二甲基化溶液核呼吸因子2
平菇 聚二烯二甲基化溶液二?；视王；D(zhuǎn)移2
香菇 聚二烯二甲基化溶液二酰基甘油?；D(zhuǎn)移1
枯草芽孢桿 3-苯基-1H-吡唑-4-甲木聚糖
毛栓孔 2,3-二磷核糖焦磷
芽胞桿 八甘單甲單羧轉(zhuǎn)運蛋白
