突變體EGFR變構抑制劑正在熱銷的產品：ADA(Human adenosine deaminase) ELISA Kit 人腺脫氨化鉺(III),六水 99.5% metals basis
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產品介紹:
EAI045是突變體EGFR變構抑制劑，在10μM ATP時抑制EGFR，EGFRL858R，EGFRT790M和EGFRL858R/T790M的IC50值分別為1.9，0.019，0.19和0.002μM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1942114-09-1 純度：99.33% 分子量：383.4 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱：突變體EGFR變構抑制劑
英文名稱：EAI045
產品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
貨號：FS-X10814
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
薄層菌人腫瘤壞死因子βAnti-OR10AD1 Antibody人骨成型蛋白2(BMP-2)
維氏紅色球菌小鼠乙型肝炎表面抗原Anti-OR10A6 Antibody人骨成型蛋白2(BMP-2)
溜曲霉大鼠白介2受體Anti-OR10A7 Antibody人環(huán)磷腺(cAMP)
猴頭人可溶性EndoglinAnti-OR10AG1 Antibody人環(huán)磷腺(cAMP)
卷枝毛霉詹森變型人腫瘤壞死因子αAnti-OR10AD1 Antibody人甘露聚糖結合凝集相關絲蛋白(MASP)
毛木耳大鼠腎上腺髓質Anti-OR10AG1 Antibody人甘露聚糖結合凝集相關絲蛋白(MASP)
枯草芽胞桿菌人腫瘤壞死因子可溶性受體ⅡAnti-OR10C1 Antibody人周期依賴性激7(CDK-7)
大腸埃希氏菌定量標準菌株大鼠β內啡肽受體Anti-OR10D4P Antibody人周期依賴性激7(CDK-7)
枯草芽孢桿菌小鼠活化蛋白CAnti-OR10C1 Antibody人周期依賴性激2(CDK-2)
異常漢遜酵母小鼠α葡萄糖Anti-OR10G2 Antibody人周期依賴性激2(CDK-2)
綿羊肺炎支原體人腫瘤壞死因子可溶性受體ⅠAnti-OR10D4P Antibody人周期依賴性激1(CDK-1)
印度洋細小棒狀菌大鼠鈣/鈣調依賴性蛋白激2Anti-OR10G6 Antibody人周期依賴性激1(CDK-1)
芽孢桿菌小鼠Anti-OR10G4 Antibody人磷化腺活化蛋白激(AMPK)
綠粘帚霉人轉化生長因子β1Anti-OR10G2 Antibody人磷化腺活化蛋白激(AMPK)
黏膜乳桿菌大鼠肝脂Anti-OR10G7 Antibody人乳脫氫(LDH)
枯草芽孢桿菌人轉化生長因子αAnti-OR10H1 Antibody人乳脫氫(LDH)
G蛋白結合蛋白RAB6A抗體蛹草1號人骨肉瘤細胞
復制激活因子C2抗體#褐色諾卡氏菌人甲狀腺癌細胞
酯抑制劑8抗體肝色牛排菌人食管鱗癌細胞
神經元突觸膜胞外分泌調節(jié)蛋白1抗體大杯香菇人子宮內膜癌細胞
突變體EGFR變構抑制劑新城疫病 TTC胰島
徐家莊鏈霉 波爾頓選擇性增肉湯添加劑優(yōu)黑
斯氏土地桿 改良CCD瓊脂添加劑增殖核抗原
分散泛 脫纖維羊血正常T表達和分泌因子
瓦克青霉 改良Skirrow瓊脂添加劑脂氧A4
腐皮殼 FBP溶液中性粒防御1-3
Brenneria rubrifaciens 青霉制備培養(yǎng)基腫瘤壞死因子α
釀酒酵母 沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基主要堿性蛋白
毛頭鬼傘 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基主要組織相容性復合體
棘孢新內果 胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)轉化生長因子β1
法氏檸檬桿 胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)組
產芽胞梭(生胞梭)（可訂購） 膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基補體片段3a
短芽孢桿 嗜鹽性試驗用胰胨水南非2型口蹄疫病抗體
灰平鏈霉 副溶血性弧成套生化鑒定管（HRGB）基質金屬蛋白13
褐單梗曲霉 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基雌二
