產(chǎn)品名稱 | HCC1569人乳腺癌細(xì)胞 | 貨號(hào) | AXB6284 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | HCC1569 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
AQP-5(Mouse Aquaporin 5) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白5Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
Ai-CD155/PVR/FITC 熒光素標(biāo)記CD155抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus aibody Rh Donkey Ai-human IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.5ml
HBeAb 乙型肝炎e抗體 96T
p95 NBS1 英文名稱： 細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白P95抗體 0.2ml
Acetoacetyl-CoA syhetase 英文名稱： 脂肪酰家族成員1抗體 0.2ml
Ai-CD155/PVR/FITC 熒光素標(biāo)記CD155抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
U S-GH(Human Ultra Sensitive growth hormone) ELISA Kit 人超敏生長(zhǎng)激素Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
Ai-Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長(zhǎng))Multi-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus aibody Rh Klotho Klotho多肽蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
NGF ELISA Kit 大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子 96T
p95 NBS1 英文名稱： DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體 0.2ml
CTAGE5 英文名稱： 皮膚T細(xì)胞淋巴瘤相關(guān)抗原5抗體(腦膜瘤表達(dá)抗原6) 0.2ml
Ai-Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長(zhǎng))Multi-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
IFN- Alpha(Human Ierferon Alpha) ELISA Kit 人α干擾素Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
Ai-Gax 生長(zhǎng)終止特異性同源盒基因抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus aibody Rh Mouse Ai-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格 0.1ml
Human similar to RIKEN cDNA 4933429F08 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 96T
p90RSK 英文名稱： 絲酸/蘇酸激酶p90RSK蛋白抗體 0.1ml
CD8 英文名稱： CD8/CD8-β抗體 0.1ml
Ai-Gax 生長(zhǎng)終止特異性同源盒基因抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
PT(Human Prothrombin0 ELISA Kit 人酶原Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
Ai-Phospho-PRAS40 (Thr246) 0酸化蛋白激酶AKT底物1抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus aibody Rh HDL/high density lipoprotein 高密度脂蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
HCC1569人乳腺癌細(xì)胞C3(Mouse Compleme 3) ELISA Kit 小鼠補(bǔ)體蛋白3 96T
p75 NGF Receptor 英文名稱： 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體抗體 0.1ml
phospho-C-REL (Ser503) 英文名稱： 0酸化淋巴細(xì)胞衍生C-型凝集素抗體 0.1ml
Ai-Phospho-PRAS40 (Thr246) 0酸化蛋白激酶AKT底物1抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
HMGCS1(Human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A syhase 1) ELISA Kit 人3-羥基-3-甲基戊二酰合酶1Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
Ai-MLH1/hMLH 1 錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus aibody Rh Insulin Receptor alpha 胰島素受體α抗體 規(guī)格 0.1ml
TNFsR- I ELISA Kit 大鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ 96T
P73 protein 英文名稱： P73抑制基因抗體 0.1ml
C21orf66 英文名稱： 21號(hào)染色體開放閱讀框66抗體 0.1ml
Ai-MLH1/hMLH 1 錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
