操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
AMG-337 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg | FS-X10813 |
產(chǎn)品介紹:
AMG-337是一種有效的高度選擇性的ATP競(jìng)爭(zhēng)性MET激酶抑制劑,IC50<5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):1173699-31-4 純度:99.19% 分子量:463.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
露濕漆斑菌小鼠肝脂Anti-NXPH3 Antibody人骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)
子午線假單胞菌大鼠尿激Anti-NXPH4 Antibody人骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)
葡萄牙假絲酵母人血管內(nèi)皮粘附分子1Anti-OAZ1 Antibody人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)
大麗花輪枝孢(棉花黃萎病菌)小鼠乙型肝炎核心抗體Anti-OAT Antibody人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)
臭曲霉小鼠乙型肝炎e抗體Anti-OCRL Antibody人1,25二羥基維生D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)
信州靈芝大鼠ⅫAnti-OGN Antibody人1,25二羥基維生D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)
冷溫木拉克酵母人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體Anti-ODF2 Antibody人組蛋白H2b(histon-H2b)
枯草芽孢桿菌人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4Anti-OLFML2B Antibody人組蛋白H2b(histon-H2b)
弗雷德里克斯堡假單胞菌小鼠乙型肝炎e抗原Anti-OLFML2A Antibody人骨保護(hù)(OPG)
草色鏈霉菌大鼠ⅩⅢAnti-OLFML2B Antibody人骨保護(hù)(OPG)
灰葡萄孢(灰霉病菌)大鼠ⅢAnti-OPN3 Antibody人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)
斑玉蕈人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3Anti-OPN4 Antibody人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)
印度毛殼小鼠乙型肝炎表面抗體Anti-OPN5 Antibody人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)
釀酒酵母小鼠二氧化Anti-OR10A4 Antibody人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)
伯頓生絲畢赤酵母大鼠載脂蛋白HAnti-OPRD1 Antibody人骨成型蛋白4(BMP-4)
香菇人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1Anti-OR10A5 Antibody人骨成型蛋白4(BMP-4)
RAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)AB17抗體白色雞腿菇人骨髓細(xì)胞
G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB38抗體雞腿菇CC77人慢性髓原白血病細(xì)胞
G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB10抗體瑞10#(雞腿菇)人畸胎瘤細(xì)胞
G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB11a抗體雞腿菇人鼻咽癌細(xì)胞
MET激酶抑制劑(AMG-337)帚狀曲霉 維生K1神經(jīng)生長(zhǎng)因子
礦泉水 大腸群 醋酯紙片神經(jīng)肽Y
絲球霉屬 3%過(guò)氧化氫試劑嗜粒趨化因子
局限青霉 多粘B(1mg/支*5)嗜性粒陽(yáng)離子蛋白
首爾紅色桿 Letheen肉湯髓磷脂堿性蛋白
支氣管敗血波氏 Letheen瓊脂褪黑
節(jié)桿 改良HC瓊脂添加劑維生D3
大腸埃希 改良HC瓊脂維生D受體
柱狀假絲酵母 雙料乳糖膽鹽(含中和劑)培養(yǎng)基間粘附分子1
根霉 乳糖膽鹽培養(yǎng)基血管活性腸肽
大豆慢生根瘤 動(dòng)力-硝鹽培養(yǎng)基(B法)血管內(nèi)皮粘附分子1
嗜嗜熱雙歧桿豬亞種 麥芽浸膏瓊脂血清總補(bǔ)體
草螺 皮膚癬鑒別瓊脂(DTM)血小板活化因子
釀酒酵母 改良Camp-BAP氏瓊脂添加劑A一氧化氮
孟氏假單胞 改良Camp-BAP氏瓊脂添加劑B一氧化氮合成