Masson三色染色液(固綠法)正在熱銷的產(chǎn)品：Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 化p21激活激1/2抗體N--N-（2-羥-3-磺）-3-鈉鹽 99%
Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) 化p21激活激1/2抗體3,3',5,5'-四聯(lián)苯鹽鹽 98%
phospho-PAK1(Ser144) 化p21
中文名稱：Masson三色染色液(固綠法)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：7×50ml|7×100ml
貨號(hào)：FS-X9960
產(chǎn)品介紹:
用途： 經(jīng)典膠原纖維染色，可區(qū)分膠原纖維和肌纖維。 注意事項(xiàng)： 染核后能更容易區(qū)分膠原纖維和肌纖維，本試劑盒采用經(jīng)典的Weigert蘇木素。其結(jié)果為：膠原纖維呈藍(lán)色，胞核呈藍(lán)褐色肌纖維、紅細(xì)胞等呈紅色。 儲(chǔ)存條件：室溫，避光，12個(gè)月 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
青榨槭葉斑病16號(hào)染色體開放閱讀框7抗體Human EIF1 兔基質(zhì)衍生因子-1(SDF-1/CXCL12)免疫試劑盒
多根硬皮馬勃16號(hào)染色體開放閱讀框57抗體Human EFHC1 兔基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒
大腸桿菌3號(hào)染色體開放閱讀框37抗體Human EFS 兔基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)免疫試劑盒
葡枝根霉3號(hào)染色體開放閱讀框49抗體Human EFHD1 兔環(huán)磷腺(cAMP)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌1號(hào)染色體開放閱讀框220抗體Human EFTUD1 兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌鈣磷蛋白1抗體Human EFTUD2 兔過(guò)氧化物體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌鈣磷蛋白2抗體Human ECD 兔過(guò)氧化物體增殖物激活受體γ(PPARG)免疫試劑盒
青霉磷化通道相互作用蛋白3抗體Human EEF1D 兔過(guò)氧化物體增殖物激活受體β(PPARβ)免疫試劑盒
劉志恒氏菌16號(hào)染色體開放閱讀框61抗體Human ECE2 兔過(guò)氧化物體增殖物激活受體α(PPARA)免疫試劑盒
嗜熱鏈球菌視錐感光環(huán)磷鳥門控通道蛋白CNG3抗體Human EEF1E1 兔骨橋(OPN)免疫試劑盒
地衣芽孢桿菌環(huán)核門控陽(yáng)離子通道蛋白β3/CNG-β3抗體Human ECEL1 兔骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒
淤泥金黃桿菌非受體酪激c-Abl抗體Human ECHS1 兔骨保護(hù)(OPG)免疫試劑盒
葡萄座腔菌屬卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白152抗體Human EEF1G 兔鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)免疫試劑盒
綠色木霉甘油二酯磷轉(zhuǎn)移抗體Human ECH1 兔干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒
無(wú)色殼囊孢嗜鉻粒B抗體Human DR3 兔鈣結(jié)合蛋白(CALB2)免疫試劑盒
貝倫格葡萄座腔菌梨生?；脱芗訅杭せ钼}啟動(dòng)受體蛋白1抗體Human ECM2 兔兒茶(CA)免疫試劑盒
金針菇Flammulina│velutipes 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRS100鈣結(jié)合蛋白A6/鈣粒蛋白A試劑盒化天竺葵
紅栓菌Trametes│cinnabarina (Jacq.: Fr.) Fr. 質(zhì)量規(guī)格：BRS100鈣結(jié)合蛋白A12/鈣粒蛋白C試劑盒硫
: ivcas7.00750資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRS100鈣結(jié)合蛋白A11試劑盒藍(lán)萼
Masson三色染色液(固綠法)釀酒酵母 1,3-二溴-4,6-二氟苯葡萄糖
大腸埃希 甘油磷絲裂原激活蛋白激激6
枯草芽孢桿枯草亞種 4-溴-2,5-二氟孤兒G蛋白偶聯(lián)受體
木耳Au888 3-溴-2,6-二氟受體自身IgG抗體
彩色豆馬勃 2,4,6-三氟受體自身IgM抗體
暗擬莖點(diǎn)霉* 1-乙基吡唑受體自身IgA抗體
黑曲霉 3,5-二硝基-2-甲D-精
圍小叢殼 2-溴-6-甲氧基CD45分子
球孢白僵 (R)-(-)-1-氨基-2-?；摎?/span>
枯草芽孢桿 4-乙氧基二苯甲酮長(zhǎng)鏈脂?；鵦oA脫氫
青霉屬 2-氨基-,4-萘醌沙眼衣原體抗體
耐堿馬賽 4,4'-聯(lián)吡啶阿黑皮原
炭黑曲霉 3,5-二膀胱腫瘤抗原
黑附球 (R)-1-BOC-3-羥甲基哌腺環(huán)化關(guān)聯(lián)蛋白2
八孢裂殖酵母 5-苯并噻唑羧肽E
