產(chǎn)品介紹:
熒光標記是研究細胞凋亡的基本方法。細胞凋亡的形態(tài)學變化及生化學變化都可以通過熒光標記的的方法而檢測出來,從而區(qū)別鑒別出正常細胞、壞死細胞或檢測細胞周期。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種DNA 結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長分別為536nm 和617nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無膜通透性,不能透過活細胞膜,只能染死細胞。因此,在熒光顯微鏡下觀察,正常細胞不能著色,壞死細胞呈強紅色熒光。采用流式細胞儀檢測細胞周期時,凋亡細胞因內(nèi)源性核酸酶被激活,使DNA 廣泛降解、斷裂,DNA 結(jié)構(gòu)發(fā)生劇變,隨著凋亡的進程,DNA 斷裂產(chǎn)生的小分子量DNA 溢出胞外,細胞總DNA 量降低,于正常G0/G1 細胞群前出現(xiàn)一DNA 低染細胞群,即G1 峰前出現(xiàn)亞二倍體峰(sub-G1)或稱A0 細胞群,即凋亡細胞群。用本試劑盒的PI 直接對細胞DNA 染色后,進行流式細胞儀分析,即可檢測到凋亡細胞DNA 的變化。 儲存:2-8℃,避光,有效期6個月。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
10ml|50ml | FS-X9833 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
達拉濱磷酯英文名: Baclofen趨化因子受體D6抗體包裝5g
,5-脲嘧啶,5-英文名: Balofloxacin Dihydrate鈣穩(wěn)態(tài)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白抗體包裝1g
維司群英文名: Balofloxacin DihydrateCHES1蛋白抗體包裝5g
枸櫞英文名: Bendamustine HCl哺乳動物性幾丁質(zhì)抗體包裝100mg
紅杉,西曲依英文名: Bendamustine HCl幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝1g
環(huán)孢D英文名: Betamethasone嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體包裝25g
吉莫斯特;英文名: Betamethasone幾丁質(zhì)1抗體包裝5g
吉西他濱英文名: Biapenem白抗原CD97 alpha 抗體包裝100mg
蝶呤英文名: Biapenem緊密連接蛋白2抗體包裝100mg
蝶呤二鈉鹽英文名: Bilibubin緊密連接蛋白7抗體包裝1g
啶鉑,吡鉑英文名: Bilibubin2號染色體開放閱讀框53抗體包裝5g
長春瑞賓/重長春瑞賓英文名: Bivalirudin TFA2號染色體開放閱讀框54抗體包裝25g
長春質(zhì)堿英文名: Bimatoprost2號染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
英文名: Bimatoprost2號染色體開放閱讀框61抗體包裝100g
卡博替尼 ;XL184英文名: Bleomycin A5 Hydrochloride 癌相關(guān)抗原抗體包裝25g
黃色長孢鏈霉菌Streptomyces│longisporoflavus 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%胰島樣因子3試劑盒異茴芹;Isopimpinellin(
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR胰島樣生長因子結(jié)合蛋白7試劑盒異土木香內(nèi)酯;Isoalantolact
弧菌Vibrio│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品胰島樣生長因子結(jié)合蛋白5試劑盒7-乙基-10-羥基;7-Ethy
細胞核染料PI染色液(即用型)銅綠假單胞 4-(三氟甲基l)芐基異酯ARHGAP4
奧氏蜜環(huán) 1-甲基-1H--5-LYN
三葉草根瘤 叔丁基二甲基羥乙氧基硅烷a2-6半乳糖的唾液寡糖
哈薩克斯坦酵母屬 (S)-N-BOC-3-甲基啉α2,6-半乳糖唾液
少孢根霉 4-(2-甲氧基乙基)嗎啉三苯氧
膠孢 6--1H-吡咯并[3,2-b]吡啶尿
圍小叢殼 1-[3-(二氟甲氧基)苯基]乙酮游離皮質(zhì)
紅紫青霉 N-CBZ-2-甲胃動蛋白2
巴斯德畢赤酵母 6--2-氟-3-甲氧基分泌性熱休克蛋白90
黃桿 2-氨基-5-甲氧基吡啶20羥二十碳四烯
牛瘟病 6-溴-2--8-環(huán)戊基-5-甲基-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7(8H)-酮19羥二十碳四烯
蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 [1,3-雙(2,4,6-三基)-2-咪唑烷亞基][[2-[2-氧代氧基]苯基]亞甲基]二西尼羅病抗體
Escherichia 1-(3,4-二基)哌西尼羅病抗原
水生黃桿 4--3-甲5,6-EET
金色鏈霉 2,4-二-5-氟8,9-EET