產(chǎn)品名稱(chēng) | Hs 695T人黑素瘤細(xì)胞 | 貨號(hào) | AXB6320 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | Hs 695T |
分類(lèi) | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類(lèi)或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞開(kāi)始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬(wàn) 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過(guò)度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過(guò)夜(如果沒(méi)有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
TE(Human telomerase) ELISA Kit 人端粒酶Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
Ai-OAT4L/URAT1 尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus aibody Rh IFI16 γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16抗體 規(guī)格 0.1ml
P III ELISA Kit 大鼠Ⅲ型前膠原基端肽 96T
PCDHA5 英文名稱(chēng)： 原鈣粘附蛋白α5抗體 0.2ml
C20orf43 英文名稱(chēng)： 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體 0.1ml
Ai-OAT4L/URAT1 尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
MMP-5(Human matrix metalloproteinase 5) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶5Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
Ai-Ghrelin/GHRP 生長(zhǎng)激素釋放肽抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus aibody Rh IFABP 小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
PAF ELISA Kit 大鼠血小板活化因子 96T
PCDHA4 英文名稱(chēng)： 原鈣粘附蛋白α4抗體 0.2ml
C21orf58 英文名稱(chēng)： 21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58抗體 0.2ml
Ai-Ghrelin/GHRP 生長(zhǎng)激素釋放肽抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
MMP-4(Human matrix metalloproteinase 4) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶4Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
ai-OCLN/Occludin 緊密連接蛋白抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus aibody Rh IFABP 小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
GIP(Mouse Glucose-depende insulin-releasing polypeptide)ELISA Kit 小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 96T
PCDHA3 英文名稱(chēng)： 原鈣粘附蛋白α3抗體 0.2ml
Cerebral protein 5 英文名稱(chēng)： 腦蛋白5抗體 0.1ml
ai-OCLN/Occludin 緊密連接蛋白抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
sTREM-1(Human soluble Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1) ELISA Kit 人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
Ai-PDCD4 凋亡相關(guān)蛋白4抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus aibody Rh HNF1/TCF1/HNF1A 肝細(xì)胞核因子1α抗體 規(guī)格 0.2ml
VC ELISA Kit 大鼠C 96T
PCDHA2 英文名稱(chēng)： 原鈣粘附蛋白α2抗體 0.2ml
CAMK1D 英文名稱(chēng)： 鈣調(diào)蛋白激酶CaMK1D抗體 0.2ml
Ai-PDCD4 凋亡相關(guān)蛋白4抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
eNOS(Human Endothelial nitric oxide syhase) ELISA Kit 人內(nèi)皮型合成酶Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
Ai-Nurr1 核受體相關(guān)因子-1抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus aibody Rh IFITM1/CD225 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
AHA(Human ai-Histone aibody) ELISA Kit 人抗組蛋白抗體 96T
PCDHA12 英文名稱(chēng)： 原鈣粘蛋白12抗體 0.2ml
C18orf1 英文名稱(chēng)： 18號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框1抗體 0.2ml
Ai-Nurr1 核受體相關(guān)因子-1抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
AOAb(Human Ai-Ovary Aibody,AOAb) ELISA Kit 人抗卵巢抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
Ai-Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 0酸化組蛋白去乙?；?、5、7抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
Hs 695T人黑素瘤細(xì)胞Rhesus aibody Rh HEC1 癌細(xì)胞高表達(dá)蛋白Hec1抗體 規(guī)格 0.2ml
DHEA-S7 ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮S7 96T
PCDHA11 英文名稱(chēng)： 原鈣粘蛋白11抗體 0.2ml
CYP26A1 英文名稱(chēng)： P450 CYP26A1抗體 0.2ml
Ai-Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 0酸化組蛋白去乙?；?、5、7抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS樣酪激酶3Multi-class aibodies規(guī)格： 48T
Ai-Osterix 成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus aibody Rh ICAM-2/CD102 細(xì)胞間粘附分子-2抗體 規(guī)格 0.2ml
BB-Ab(Human ai-B burgdorleri aibody) ELISA Kit 人抗BB抗體 96T
PCDHA10/CNRN8 英文名稱(chēng)： 鈣粘蛋白相關(guān)神經(jīng)受體8抗體 0.2ml
C17orf53 英文名稱(chēng)： 17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框53抗體 0.2ml
Ai-Osterix 成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體Multi-class aibodies規(guī)格： 0.1ml
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過(guò)大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率。
