細(xì)胞修復(fù)抑制劑(Carboplatin)正在熱銷的產(chǎn)品：TRF1/FITC 熒光標(biāo)記端粒結(jié)合蛋白1抗體IgGFmoc-L-天冬氨 alpha-烯酯 97%
TRF2/FITC 熒光標(biāo)記端粒結(jié)合蛋白2抗體IgGFmoc-L-天冬氨 beta-叔丁酯 98%
TRH/FITC 熒光標(biāo)記促狀腺釋放激抗體IgGN-芴氧羰-D-天冬氨-4-叔丁酯 97%
TRIM32/FITC 熒光標(biāo)記TRIM32
中文名稱：細(xì)胞修復(fù)抑制劑(Carboplatin)
英文名稱：Carboplatin
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg
貨號(hào)：FS-X10389
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：Carboplatin 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg Carboplatin能與DNA結(jié)合，干擾細(xì)胞修復(fù)。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：41575-94-4 別名：cis-Diammine(1,1-cyclobutanedicarboxylato)platinum 純度：98.25% 分子量：371.25 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
魯氏接合酵母NADH氧化還原輔10抗體Human ADAM12(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 12) 鈣調(diào)磷(CaN)
乳乳球菌膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2抗體Human CD200(OX-2 membrane glycoprotein) 鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)
木伏革菌=佐佐木薄膜革菌跨膜受體蛋白Notch-2抗體Human CCL8(C-C motif chemokine 8) 鈣腔蛋白(CALU)
黃桿菌磷化KB抑制蛋白β抗體Human MME(Neprilysin) 鈣聯(lián)蛋白(CNX)
變黑梨花歐文氏菌磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human ENG(Endoglin) 鈣聯(lián)蛋白(calnexin)
球形節(jié)桿菌泛樣蛋白NEDD8抗體Human CD147(Extracellular Matrix Metalloproteinase Inducer) 鈣離子通道抗體(VGCC)
擬莖點(diǎn)霉核因子1C型抗體Human CD13(Aminopeptidase N) 鈣結(jié)合蛋白(CR)
釀酒酵母磷化神經(jīng)正五聚體1抗體Human sCD163(Soluble Cluster of Differentiation 163) 鈣激活中性蛋白6(CAPN6)
黑曲霉RNA結(jié)合蛋白NOB1抗體Human ApoB100(Apolipoprotein B100) 鈣激活中性蛋白1(CAPN1)
簡(jiǎn)青霉磷化T激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體Human CCL17(C-C motif chemokine 17) 鈣蛋白抑制蛋白(T)
釀酒酵母膽汁受體抗體Human ADAM9(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 9) 鈣蛋白抑抗體(AT-DⅣ)
(蠟狀芽胞桿菌)NFKB激活蛋白抗體Human CCL18(C-C motif chemokine 18) 鈣蛋白2(M/II)大亞基(CAPN2)(CAPN2)
根瘤菌NLE1蛋白抗體Human ADAMTS1(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1) 鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2(CAMK 2)
季也蒙假絲酵母磷化一氧化氮合成3（內(nèi)皮型）抗體Human MIF(Macrophage migRation inhibitory factor) 富組蛋白(HTN5)
傳染性法氏囊病病磷化一氧化氮合成3（內(nèi)皮型）抗體Human MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) 富組蛋白(histatin-5)
芽孢桿菌屬磷化一氧化氮合成3（內(nèi)皮型）抗體Human MIP-3β(Macrophage Inflammatory Protein 3β) 富組糖蛋白(HRG)
凝結(jié)芽孢桿菌Bacillus│coagulans 質(zhì)量規(guī)格：>98%,VEGFR2選擇性抑制劑
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
變異鏈霉菌Streptomyces│variabilis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
細(xì)胞修復(fù)抑制劑(Carboplatin)枯草芽孢桿 4-乙基環(huán)己酮鹽
斯氏土地桿 胞啶-5'-二磷 二鈉鹽Ras 蛋白
毛栓 乙鍶干擾誘導(dǎo)蛋白1
盤長(zhǎng)孢狀盤孢 4-羥基-3-硝基吡啶載脂蛋白B48
土生叢毛單胞 2-庚Ca-Mg-ATP
4-異基環(huán)己酮巨噬炎性蛋白
聚酵芽孢桿 3-芐氧基溴烷Ⅰ型膠原α1
釀酒酵母 鹽苯吖啶Ⅰ型膠原α2
秀珍菇 4-溴 氫鹽線粒體呼吸鏈復(fù)合物II
雞傳染性支氣管炎病 5-硝基-2-線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV
球孢白僵 (+)-γ-維生EGremlin-1蛋白
榆耳 1,10-菲羅啉-5-氨基P-CREB
香菇 2,4-二-6-甲基嘧啶UDP葡糖基轉(zhuǎn)移1家族多肽A1
Thermoactinomyces? 3-氨基吡-2-羧UDP葡糖基轉(zhuǎn)移1家族多肽A3
Nocardioides DL-α-氨基己二UDP葡糖基轉(zhuǎn)移1家族多肽A4
