產品介紹:
CCCP通過破壞線粒體膜電位(MMP)來抑制STING介導的IFN-β產生。CCCP且抑制STING及其下游信號分子TBK1和IRF3的激活。
注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！
號：555-60-2
別名：Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone;Carbonyl Cyanide m-Chlorophenylhydra
產品介紹:
CCCP通過破壞線粒體膜電位(MMP)來抑制STING介導的IFN-β產生。CCCP且抑制STING及其下游信號分子TBK1和IRF3的激活。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：555-60-2 別名：Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone;Carbonyl Cyanide m-Chlorophenylhydrazone 純度：99.83% 分子量：204.62 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
英文名稱：CCCP
產品規(guī)格：1mL(10mM)|50mg
貨號：FS-X10810
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
多主葡萄殼菌人表皮生長因子Anti-NOXO1 Antibody人脂蛋白α(Lp-α)
葡萄座腔菌人堿性成纖維生長因子Anti-NOX3 Antibody人脂蛋白α(Lp-α)
糙皮側耳大鼠可溶性CD14Anti-NPAS1 Antibody人骨膠原交聯(Cr)
變平滑假絲酵母小鼠β淀粉樣蛋白1-42Anti-NPAS2 Antibody人骨膠原交聯(Cr)
*灰葡萄孢大鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管激Anti-NPHP4 Antibody人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)
枯草芽胞桿菌小鼠8羥基脫氧鳥Anti-NPDC1 Antibody人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)
考克氏菌屬人巨噬炎性蛋白5Anti-NPDC1 Antibody人脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)
水稻節(jié)桿菌小鼠白介1受體拮抗劑Anti-NPRL2 Antibody人脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)
果生鏈核盤菌大鼠雄激Anti-NR1I3 Antibody人吡啶交聯物(PY)
薄層菌屬人可溶性E選擇Anti-NR4A3 Antibody人吡啶交聯物(PY)
西唐氏鏈霉菌人可溶性間粘附分子1Anti-NR2F2 Antibody人骨橋(OPN)
黑曲霉小鼠降鈣原Anti-NRAS Antibody人骨橋(OPN)
*灰葡萄孢大鼠Toll樣受體4Anti-NRAS Antibody人γ基丁(GABA)
熒光假單胞菌大鼠多巴轉運蛋白Anti-NRBF2 Antibody人γ基丁(GABA)
大腸埃希氏菌小鼠胰島自身抗體Anti-NRIP3 Antibody人P物質受體(SP-R)
擴展短桿菌人間粘附分子2Anti-NRIP2 Antibody人P物質受體(SP-R)
核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體長柄條孢牛肝人T淋巴瘤轉基因細胞
環(huán)指蛋白213蠟磨屬人T淋巴瘤細胞Jurkat亞系
Rap2A抗體猴頭人前列腺癌高轉移細胞株
受體表達蛋白5/息肉相關蛋白抗體FV21（金針菇）C57小鼠黑色瘤瘤株
STING介導IFN-β產生抑制劑(CCCP)綠色木霉 改良克氏雙糖鐵培養(yǎng)基白介13
釀酒酵母 烯基基二硫白介15
彎孢 烯基二硫白介17A
大腸埃希 三亞苯白介18
紫色鏈霉 2-氨基-5-氟吡啶白介1β
滑假絲酵母 乙酰酮鈷（III）白介2
硬皮馬勃屬 4-甲苯三氟白介25
銹色野野村氏 2-甲基-1,3-（MPO)白介3
乳粉 沙門氏（陰性） 1，6-二己烷白介4
小卷霉 2,4,6-三氮白介5
露濕漆斑 N,N-二甲基烯基白介6
根霉 3,5-二甲氧基甲酯白介8
運動節(jié)桿 4-氨基苯頻哪酯二
南類芽孢桿 (S, S)-環(huán)己二補體蛋白3
球孢白僵 2′-溴苯乙酮超氧化物歧化
