microtubule抑制劑（Ansamitocin P-3）正在熱銷的產(chǎn)品：Human Protein Carbonyl,PC ELISA Kit 人羰化蛋白氧化釔 99.99% metals basis
human phospho-inhibitory subunit of NF-κB Alpha,pIKB Alpha ELISA kit 人化核因子κB抑制蛋白α（IKKα human
產(chǎn)品介紹:
Ansamitocin P-3是一種微管(microtubule)抑制劑。Ansamitocin P-3是一種大環(huán)抗腫瘤抗生素。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：66584-72-3 別名：Antibiotic C 15003P3;Maytansinol butyrate;C15003P3 純度：98.0% 分子量：635.14 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱：microtubule抑制劑（Ansamitocin P-3）
英文名稱：Ansamitocin P-3
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10885
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
棘殼孢屬人EJ抗體/抗甘酰tRNA合成抗體Anti-SLC27A5 Antibody人補體片斷5b(C5b)
異常威克漢姆酵母人低密度脂蛋白免疫復合物Anti-SLC26A3 Antibody重鏈(IgH)
大豆慢生根瘤菌小鼠膽囊收縮/腸促胰肽Anti-SLC27A5 Antibody重鏈(IgH)
短短小芽胞桿菌大鼠17羥皮質(zhì)類固Anti-SLC28A2 Antibody重鏈可變區(qū)(IgHV)
埋藏曲霉小鼠腦腸肽Anti-SLC28A2 Antibody重鏈可變區(qū)(IgHV)
金龜子綠僵菌(可訂）人抗增殖核抗原抗體Anti-SLC30A9 Antibody人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)
芽孢桿菌屬大鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖Anti-SLC34A2 Antibody人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)
Frondihabitans大鼠17-類固Anti-SLC2A3 Antibody人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)
枯草芽孢桿菌人抗IgE受體抗體Anti-SLC38A2 Antibody人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)
摩氏摩根菌小鼠6前列腺Anti-SLC39A1 Antibody人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)
葡萄座腔菌大鼠白介2可溶性受體α鏈Anti-SLC39A2 Antibody人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)
華根霉人抗IVIgG抗體Anti-SLC39A7 Antibodyj鏈(Ig-j)
乙假絲酵母小鼠載脂蛋白A1Anti-SLC39A7 Antibodyj鏈(Ig-j)
水生拉恩氏菌大鼠白介2可溶性受體β鏈Anti-SLC43A1 Antibody人血紅蛋白β亞基(HB-β)
根瘤菌人抗心肌抗體Anti-SLC3A2 Antibody人血紅蛋白β亞基(HB-β)
解蛋白弧菌小鼠載脂蛋白B0Anti-SLC39A9 Antibody人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)
腫瘤蛋白D53抗體短裙竹蓀1-2ETMcAb3A7
血栓B2抗體一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因玉大斑病菌5G9AE3
新型抑癌基因抗體桑黃D3-D3
環(huán)指蛋白5抗體柑橘綠霉病TBEA8
microtubule抑制劑（Ansamitocin P-3）釀酒酵母 鋰、鈉/Li, Na/2.0µg/ml ;、氨/K, NH3/200µg/ml粘蛋白5AC
草青霉 銅、錳、鋅/Cu, Mn, Zn/0µg/ml ;鐵/Fe/500µg/ml血小板糖蛋白V
雞傷門氏 鎘、鋅/Cd, Zn/µg/ml ;銅/Cu/50µg/ml ;鉛/Pb/0µg/ml骨形成蛋白2
解脂亞羅酵母 砷、鎘、鉛/As, Cd, Pb/µg/ml ;錳/ Mn/0µg/ml肌鈣蛋白I
立枯絲核 鉻/Cr/0.5µg/ml ;釩、鋯/V, Zr/1.0µg/ml ;鋁、鈦/Al, Ti/µg肌鈣蛋白T
大腸埃希氏 鈣、、鎂、鈉/Ca, K, Mg, Na/5µg/ml ;鋁、鐵、鋅/Al, Fe, Zn/µ谷氨酰合成
枯草芽孢桿 銅、錳、鋅/Cu, Mn, Zn/0µg/ml ;鐵/Fe /500µg/ml ;、鈣、鈉、鎂X
硫色鐮刀 鋇、銅、錳/Ba, Cu, Mn/5µg/ml ;鋰、硒、鋅/Li, Se, Zn/µg/mlⅨ
蛋白原乳桿 鎘、鉻、硒/Cd, Cr, Se/1µg/ml ;砷、銅、錳、鎳、錢/As, Cu, Mn, Ni,性鞘磷脂
哈茨木霉 鋁、砷、鋇、鎘、鈷、鉻、銅、錳、鉬、鎳、鉛、硒、鍶、鋅/Al, As, Ba, Cd, Co, Cr玉赤霉烯酮
棲藻海卵 砷、鋇、鎘、鉻、銅、鐵、鎂、錳、鎳、鋅/As, Ba, Cd, Cr, Cu, Fe, Mg, Mn觸珠蛋白
楊盤二孢* 鋁、砷、、鋇、鈹、鎘、鈷、鉻、銅、錳、鉬、鈉、鎳、鉛、銻、硒、錫、鈦、、釩、鋅、鋯/Al, As過氧化氫
蟹味菇（白） 鋁、砷、、鋇、鈹、鎘、鈷、鉻、銅、錳、鉬、鈉、鎳、鉛、銻、硒、錫、鈦、、釩、鋅、鋯/Al, AsIII型前膠原
枯草芽孢桿 鋇、鍶、/Ba, Sr, Tl /50µg/ml ;鋁、砷、、鈹、鉍、鈣、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、IV型膠原
大腸桿 鋇/Ba/1600µg/ml ;鍶/Sr/600µg/ml ;鈣/Ca/400µg/ml ;鎂/Mg羥脯
