英文名稱 | ARH-77 | 貨號 | AXB6126 |
生長特性 | 貼壁細胞 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
分類 | 人細胞系 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
ARH-77人白血病細胞用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
AChE ELISA Kit 大鼠乙酰酯酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-Talin (Ser425) 0酸化踝蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Chicken IgG 羊抗雞IgG 規(guī)格 1mg
u-T4 ELISA Kit 大鼠高敏甲狀腺素 96T
Nephrin 英文名稱： 腎小球細胞粘附分子受體抗體 0.1ml
BNP 英文名稱： 腦素/利肽抗體 0.2ml
Anti-Phospho-Talin (Ser425) 0酸化踝蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human urease related protein C,UreC ELISA Kit 人尿素酶相關(guān)蛋白CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Slit2/Slil3 神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
AQP-0(Mouse Aquaporin 0) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白0 96T
Neogenin 英文名稱： 神經(jīng)細胞粘附蛋白NGN抗體 0.1ml
Phospho-BMX (Tyr40) 英文名稱： 0酸化非受體性蛋白酪酸激酶ETK抗體 0.1ml
Anti-Slit2/Slil3 神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit 人S100蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-SSEA3 階段特異性胚胎表面抗原-3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgM/APC APC標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格 0.1ml
ARH-77人白血病細胞Hsp-60 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白60 96T
NENF 英文名稱： 神經(jīng)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 0.2ml
BAFFR 英文名稱： B細胞活化因子受體抗體 0.2ml
Anti-SSEA3 階段特異性胚胎表面抗原-3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TLR-9/CD289 ELISA kit 大鼠Toll樣受體9Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
anti-Rarres2/TIG2 受體應(yīng)答蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Glycogen synthase 2 葡萄糖合成酶2抗體 規(guī)格 0.2ml
cTn- I (Mouse cardiac troponin I ) ELISA Kit 小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ 96T
Nemo-like kinase 英文名稱： Nemo樣激酶抗體 0.1ml
AADACL1 英文名稱： 中性酯水解酶1抗體 0.2ml
anti-Rarres2/TIG2 受體應(yīng)答蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
