酵母活性檢測(cè)試劑盒-AlamarBlue正在熱銷的產(chǎn)品：Caspase-6 (NT) 半胱蛋白蛋白-6抗體(N端)滅草隆
Caspase-6 (NT) 半胱蛋白蛋白-6抗體(N端)滅草隆
Caspase-7 半胱蛋白蛋白-7抗體N-酮 97%
Caspase-8 半胱氨蛋白8抗體一氧化異戊二烯 95%
Caspase-9 白介1-β轉(zhuǎn)化樣凋亡蛋白6抗體異戊 分子生物學(xué)級(jí),>99%(GC
產(chǎn)品介紹:
AlamarBlue 酵母活性檢測(cè)試劑盒是應(yīng)用新型的氧化還原指示劑阿爾瑪藍(lán)快速高靈敏度檢測(cè)酵母活性的比色檢測(cè)產(chǎn)品。 AlamarBlue 是一種氧化還原指示劑，能根據(jù)酵母的代謝活性產(chǎn)生吸光度變化和熒光信號(hào)。這種測(cè)定是基于具有代謝活性的細(xì)胞將試劑轉(zhuǎn)換成熒光和比色指示劑的能力。受損和無(wú)活性細(xì)胞具有較低的天然代謝活性，因此對(duì)應(yīng)的信號(hào)較低。 AlamarBlue 在氧化狀態(tài)下呈現(xiàn)紫藍(lán)色無(wú)熒光性，而在還原狀態(tài)下，轉(zhuǎn)變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產(chǎn)物，其吸收峰為530-560nm，而散射峰為590nm。在酵母細(xì)胞增殖過(guò)程中，細(xì)胞內(nèi)處于還原環(huán)境。進(jìn)入酵母細(xì)胞內(nèi)的活性檢測(cè)染料被代謝中間體及細(xì)胞色素類還原后釋放到酵母細(xì)胞外并溶于培養(yǎng)基中，使培養(yǎng)基從無(wú)熒光的靛青藍(lán)變成有熒光的粉紅色。后用普通分光光度計(jì)或熒光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)，吸光度和熒光強(qiáng)度與活性酵母細(xì)胞數(shù)成正比。染料經(jīng)過(guò)驗(yàn)證安全無(wú)毒，可以用于酵母細(xì)胞活性和酵母細(xì)胞增殖的定量分析細(xì)胞毒性研究。 AlamarBlue 的無(wú)毒特性使酵母細(xì)胞可長(zhǎng)期暴露于這種染料，因此可隨時(shí)間進(jìn)行測(cè)量或進(jìn)行終點(diǎn)測(cè)量。 AlamarBlue 法采用單一試劑，可以連續(xù)、快速地檢測(cè)酵母細(xì)胞的增生狀態(tài)。由于AlamarBlue對(duì)酵母細(xì)胞無(wú)毒、無(wú)害，不影響細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成與分泌等活性，因此可以對(duì)同一批酵母細(xì)胞的增生狀態(tài)進(jìn)行連續(xù)觀察和進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)觀察，因此有操作簡(jiǎn)便和幾乎不干擾酵母細(xì)胞正常代謝的特點(diǎn)。 儲(chǔ)存條件：檢測(cè)液2-8℃避光保存； 有效期：一年。 |
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：250T|500T|1000T
貨號(hào)：FS-X9720
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
大內(nèi)皮(Big ET)英文名：Big ET 溶血磷脂?；D(zhuǎn)移D抗體包裝1g
大動(dòng)脈平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)英文名：Acta2/Actsa/Actvs 載脂蛋白E3抗體包裝250mg
催乳抑制激(PIH)英文名：PIH ABI基因家族2抗體包裝1g
催乳釋放激(PRH)英文名：PRH 氧化蛋白質(zhì)解包裝5g
催乳(PRL)英文名：PRL 鐵調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝500mg
催產(chǎn)(OT)英文名：OT 乙脫氫1型抗體包裝50mg
促有絲分裂因子(MF/MPF)英文名：MF/MPF AFP4a蛋白抗體包裝1g
促性腺激釋放激(GnRH)英文名：GnRH Rho GTP激活蛋白32抗體包裝250mg
促生長(zhǎng)激釋放激(GHRH)英文名：GHRH 能量平衡相關(guān)蛋白抗體包裝5g
促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)英文名：CRF 禽腦脊髓炎病AEV抗體包裝5mg
促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)英文名：ACTH 腺苷環(huán)化7抗體包裝25g
促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)英文名：CRH 腺苷環(huán)化4抗體包裝5g
促卵泡(FSH)英文名：FSH 腺苷活化蛋白激γ1抗體包裝1g
促狀腺釋放激(TRH)英文名：TRH 芳香N-乙酰化轉(zhuǎn)移抗體包裝1g
促狀腺(TSH)英文名：TSH 腺苷環(huán)化8抗體包裝1g
三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)AR-A014418 is an ATP-competitive, and selective GSK3β inhibitor with IC50 and Ki
酵母活性檢測(cè)試劑盒-AlamarBlue丁香假單胞 4-羥基-6-喹唑啉基質(zhì)金屬蛋白8
異常威克漢姆酵母 6--4-羥基喹唑啉基質(zhì)金屬蛋白9
假交替單胞屬 2-甲氧基-3-硝基-4-基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1
棲土曲霉 1-乙酰-4-基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2
蜥蜴纖細(xì)芽孢桿 2-(1H-吡唑-1-基)乙酸基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3
釀酒酵母 5--6-甲基基質(zhì)裂解蛋白;基質(zhì)溶
*櫻桃鏈格孢 1-(3-甲氧基苯基)哌基質(zhì)裂解
金龜子綠僵 N,N-二甲基1,4-丁烷二基質(zhì)衍生因子1
釀酒酵母 4-甲基-2-戊基-1,3-二氧戊環(huán)基質(zhì)衍生因子1α
Sphingobium rhizovicinum 2--5-甲氧基苯并咪唑基質(zhì)衍生因子1β
大腸埃希氏 3,4-二甲氧基甲酯基質(zhì)相互作用分子1
小孢擬盤多毛孢 N-Boc-4-亞甲基激活A(yù)
盤長(zhǎng)孢狀盤孢 2'-F-Ac-dC亞磷酰單體敏感性脂肪
玫煙色棒束孢 N-乙?；?5'-O-[雙(4-甲氧基苯基)苯基]-2'-脫氧-2'-氟胞苷激肽釋放10
豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS3 3-氟-2-激肽釋放11
