CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒(WST-8法)公司正在出售的產(chǎn)品：總膽固（TC）含量測試盒 規(guī)格：100管/96樣 測試方法：微量法
總膽固（TC）含量測試盒 規(guī)格：50管/48樣 測試方法：可見分光光度法
甘油三酯（TG）含量測試盒 規(guī)格：50管/48樣 測試方法：可見分光光度法
羥酸（HYP）測試盒 規(guī)格：100管/96樣 測試方法：微量法
羥脯酸（HYP）測試盒 規(guī)格
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Cell Counting Kit-8 | 100次|500次|2500次|10000次 | FS-X9530 |
產(chǎn)品介紹：
本試劑盒是一種基于WST-8而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞 毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。 WST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成 橙黃色的formazan(參考下圖)。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān) 系。 WST-8是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品，和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先，MTT 被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解；而WST-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的，可 以省去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-8產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn) 定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬，靈敏度更高。 WST-8和WST-1相比，檢測靈敏度更高，更易溶解，并且更加穩(wěn)定。 本試劑盒可以用于細(xì)胞因子等誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖檢測，也可以用于抗癌藥物等對細(xì)胞有毒試劑誘導(dǎo)的細(xì)胞毒 性檢測，或一些藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞生長抑制檢測。 本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，無須再進(jìn)行任何配制等操作 。無須使用同位素，所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞，不必收集細(xì)胞，也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于 大批量樣品的檢測。酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。 WST-8對細(xì)胞無明顯毒性。加入CCK-8溶液顯色后，可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板，使檢測時(shí)間更加靈 活，便于找到佳測定時(shí)間。 |
注意事項(xiàng)：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
蛋白酶激活受體1(PAR1)檢測試劑盒 forProteaseActivatedReceptor1(PAR1)
腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒 forAdenosineDeaminase(ADA)
尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)檢測試劑盒 forNicotinamideAdenineDinucleotidePhosphateOxidase4(NOX4)
鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶A2(ATP2A2)檢測試劑盒 forATPase,Ca++Transporting,CardiacMuscle,SlowTwitch2(ATP2A2)
Dachsous1蛋白(DCHS1)檢測試劑盒 forDachsous1(DCHS1)
金屬硫蛋白1L(MT1L)檢測試劑盒 forMetallothionein1L(MT1L)
小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)檢測試劑盒 forSmallNuclearRibonucleoproteinPolypeptideD1(SNRPD1)
內(nèi)分泌腺來源血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)檢測試劑盒 forEndocrineGlandDerivedVascularEndothelialGrowthFactor(EG-VEGF)
補(bǔ)體受體4(CR4)檢測試劑盒 forComplementReceptor4(CR4)
AMPA離子能谷氨受體3(GRIA3)檢測試劑盒 forGlutamateReceptor,Ionotropic,AMPA3(GRIA3)
Toll樣受體2(TLR2)檢測試劑盒 forTollLikeReceptor2(TLR2)
X-框結(jié)合蛋白1(XBP1)檢測試劑盒 forX-BoxBindingProtein1(XBP1)
Heterotaxy1蛋白(HTX1)檢測試劑盒 forHeterotaxy1(HTX1)
Ets變異體3(ETV3)檢測試劑盒 forEtsVariant3(ETV3)
白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM)檢測試劑盒 forActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule(ALCAM)
Salusinβ蛋白(Salusinβ)檢測試劑盒 forSalusinBeta
絲蛋白Bβ(FLNβ)檢測試劑盒 forFilaminBBeta(FLNb)
CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒(WST-8法)釓噴酸單葡胺標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Gadopentetate Monomeglumine
吩噻嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Phenothiazine
依莰舒三乙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Ecamsule Triethanolamine
依莰舒溶液標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:0．5ml 英文名稱：Ecamsule Solution
丙烯（E）-異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱：Cefprozil (E)-Isomer
東莨菪內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱：Scopoletin
5-硝基糠醛二乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Nitrofurfural Diacetate
二環(huán)己基標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:2ml×2amplues 英文名稱：Dicyclohexyl
沙醇標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Iodixanol
毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:300mg 英文名稱：Pilocarpine
操作步驟：
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
