細(xì)菌活性檢測(cè)試劑盒-CCK8正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：CT-1/CTF1 心肌營(yíng)養(yǎng)1抗體茉莉酯 95%
CA I 碳酐1抗體7- 98%
CTNNAL1 粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體己酯 Standard for GC,>99.5%(GC)
CA II 碳酐2抗體己酯 ,≥99.7% (GC)
/CSE1 凋亡敏感性因(s)-(+)-α-氧-α-(三氟)苯酰 99%
Phospho-Cas
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱(chēng)：細(xì)菌活性檢測(cè)試劑盒-CCK8
英文名稱(chēng)：
產(chǎn)品規(guī)格：250T|500T|1000T
貨號(hào)：FS-X9718
產(chǎn)品介紹:
細(xì)菌活性檢測(cè)試劑盒 (CCK-8 法)是應(yīng)用新型的水溶性四唑鹽2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽快速高靈敏度檢測(cè)細(xì)菌活性的比色檢測(cè)產(chǎn)品。 本四唑鹽在電子載體存在的情況下能夠被細(xì)菌的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan，生成的Formazan 量與細(xì)菌的活性成正比。細(xì)菌活性越強(qiáng)，則顏色越深；細(xì)菌活性越弱，則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)菌，顏色的深淺和細(xì)菌活性呈線性關(guān)系。 CCK-8溶液可以直接加入到細(xì)菌樣品中，不需要預(yù)配各種成分，CCK-8溶液很穩(wěn)定，對(duì)細(xì)菌沒(méi)有毒性，可以長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)細(xì)菌。 儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。長(zhǎng)期不用分裝后-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融。 注意： 1．CCK-8短期存放于2-8℃，長(zhǎng)期存放請(qǐng)分裝后-20℃避光保存。 2．避免反復(fù)凍融。 3．凍存后溶解時(shí)注意重新混勻。 有效期：一年。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
多巴胺(DA)英文名：DA 自噬相關(guān)蛋白16A抗體包裝10mg
對(duì)基(PABA)英文名：PABA 磷化自噬相關(guān)蛋白4D抗體包裝10MG
端粒(TE)英文名：TE 磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝1g
毒蕈鹼乙酰受體M2(CHRM2)英文名：CHRM2 磷化自噬相關(guān)蛋白7抗體包裝250mg
毒性休克綜合征毒1(TSST-1)英文名：TSST-1 磷化自噬相關(guān)蛋白16A抗體包裝5g
(AZT)英文名：AZT 磷化自噬相關(guān)蛋白9A抗體包裝10MG
凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)英文名：AIF 磷化自噬相關(guān)蛋白4D抗體包裝1g
凋亡相關(guān)因子配體(FASL)英文名：FASL 磷化自噬相關(guān)蛋白4D抗體包裝1g
凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)英文名：FAS/CD95 磷化腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體包裝5g
第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)英文名：FⅧAg 磷化自噬相關(guān)蛋白4A抗體包裝1g
抵抗(Resistin)英文名：Resistin 磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝5g
低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)英文名：HIF-1α 磷化自噬相關(guān)蛋白16A抗體包裝100g
低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)英文名：LDL-IC 磷化蛋白激AKT3抗體包裝25g
低密度脂蛋白(LDL)英文名：LDL 磷化腎上腺能受體β2抗體包裝500g
蛋白磷(PP)英文名：PP 磷化通道蛋白2抗體包裝1g
凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端）結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)Ampalex (Ampakine CX516; CX516; BDP 12) is an ampakine and nootropic that acts a
細(xì)菌活性檢測(cè)試劑盒-CCK8害艾美耳球蟲(chóng) 鹽酸維拉唑酮活性氧簇
黃曲霉 3-氟-2-酸活性依賴(lài)性神經(jīng)保護(hù)因子
泡盛曲霉 正己基酸饑餓
球孢白僵 4-乙氧基-3-肌鈣蛋白I
肺炎克雷伯氏肺炎亞種 3-甲基噠肌鈣蛋白T
葡萄座腔 辛酸硫酯血肌酐
炭黑曲霉 2-氟-3-甲氧基吡啶肌紅蛋白
凹陷芽孢桿 2-氨基-5-溴苯甲酰肌腱蛋白R(shí)
ATCC 6939 4-正辛基苯骨骼肌受體酪激抗體
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 芬戈莫德肌球蛋白輕鏈激
枯草芽孢桿 1,3-二氫噻吩[3,2-D]嘧啶-2,肌球蛋白重鏈
巴斯德畢赤酵母 1-氟-4-羥基-1,4-重氮化二環(huán)2.2.2辛烷雙（四氟酸鹽）肌肉生長(zhǎng)抑制;肌抑
豇豆慢生根瘤 4,4'-(2,3-乙烯基雙氧噻吩-5,7-二基)雙(N,N-雙(4-甲氧苯基)苯)肌酸激
大腸埃希 1-Boc-3-氨甲基肌酸激同工BB
葡萄座腔 硫酸胱肌酸激同工MB
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
