NAMPT抑制劑(GMX1778)(CHS-828正在熱銷的產品：VE(Human Vitamin E) EELISA Kit 人維生E庫侖法通用型陽用卡爾費休試劑 用作有隔膜式陽電解液
VA(Human Vitamin A) ELISA Kit 人維生A3,3-二-1-丁炔 95%
GEF(Human Guanine Exchange Factor) ELISA Kit 人鳥交換因子β-環(huán)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱：NAMPT抑制劑(GMX1778)(CHS-828
英文名稱：GMX1778
產品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
貨號：FS-X10856
產品介紹:
GMX1778(CHS-828)是NAMPT高效抑制劑，可抑制劑NAD_addition_的生化合成，IC50值小于25nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：200484-11-3 純度：99.65% 分子量：371.86 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
耐多抗諾卡氏菌大鼠P物質Anti-PRKAR1A Antibody人類似RIKEN cDNA 26307008 基因
長孢洛德酵母大鼠αL巖藻糖Anti-PRKAG2 Antibody人類似RIKEN cDNA 26307008 基因
卷枝毛霉卷枝變型小鼠γ干擾誘導蛋白16/p16Anti-PRKAR1B Antibody人類似RIKEN cDNA 209K09 基因
安大略假絲酵母人肺炎支原體抗體Anti-PRKAR2A Antibody人類似RIKEN cDNA 209K09 基因
泡盛曲霉人肺炎衣原體抗體Anti-PRKD1 Antibody人ras同源物基因家族成員b(RHOB)
阿爾通山堿線菌大鼠甲狀腺過氧化物Anti-PRKCZ Antibody人ras同源物基因家族成員b(RHOB)
膠孢小鼠基質衍生因子1aAnti-PRKCD Antibody人假定蛋白LOC677340
食吡啶紅球菌小鼠血管內皮生長因子Anti-PRKCSH Antibody人假定蛋白LOC677340
香菇大鼠胰島Anti-PRKDC Antibody人假定蛋白LOC433328
大腸埃希菌人肺耐藥蛋白Anti-PRKG1 Antibody人假定蛋白LOC433328
釀酒酵母人α1抗胰糜蛋白Anti-PRKG2 Antibody人髓樣分化因子初次應答基因88(MYD88)
黃傘大鼠抗IgE受體抗體Anti-PRKG2 Antibody人髓樣分化因子初次應答基因88(MYD88)
中孢短芽孢桿菌小鼠血漿α顆粒膜蛋白Anti-PRKX Antibody人干擾活化基因205(Ifi205)
普雷恩毛霉大鼠抗IVIgG抗體Anti-PRKN Antibody人干擾活化基因205(Ifi205)
芹側耳（杏鮑菇）人肺表面活性物質相關蛋白AAnti-PROKR1 Antibody人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)
哈氏弧菌小鼠髓過氧化物Anti-PRKY Antibody人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)
TBR1蛋白抗體硫色鐮刀菌KYSE180 人食管鱗癌細胞
感光細胞轉錄因子TULP3抗體枝狀枝孢KYSE140 人食管鱗癌細胞
TSK蛋白抗體擬土黃紅菇SNU119 人卵巢癌細胞
味覺受體蛋白家族2亞基5抗體茶銀耳A1847 人卵巢癌細胞
NAMPT抑制劑(GMX1778)(CHS-828產紅青霉 CHO培養(yǎng)基基礎轉化生長因子β
基簡馬杜拉放線 SCHAEDLER瓊脂轉化生長因子β1
尿腸球 Campy-Cefex瓊脂基礎轉鐵蛋白
褐紅小孔 2,5-二吡啶轉鐵蛋白受體
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 Campy-Cefex添加劑總蛋白
平菇 Nα-甲?；?DL-色總抗氧化能力
托姆青霉 L-1,4-二硫代蘇糖阻抑
豌豆根瘤 4-甲基組
黑曲霉 (S)-(-)-環(huán)氧烷組織因子
玉乳桿 三(二基)膦腦磷脂
假單胞 二環(huán)己烷并18-冠-6
黃肉座 2,2'-(2-丁炔-1,4-二基二氧)二乙(含約的異構體)心磷脂
樟疫霉 苯基三乙基溴化鞘磷脂
解脂假絲酵母 單硝異山梨酯偽狂犬病病GPI
香菇 2-氨基-5-內皮型一氧化氮合
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
