DNA解旋抑制劑(Irinotecan)正在熱銷的產(chǎn)品：HIF-2 Alpha (Hypoxia-inducible factor-2 Alpha) 缺氧誘導(dǎo)因子2α 抗原4-苯 97%
Histone H1b(Histone H1.4) 組蛋白H1b抗原4-羥苯 97%
HDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 組織蛋白去酰化1抗原2--6-吡啶 97%
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中文名稱：DNA解旋抑制劑(Irinotecan)
英文名稱：Irinotecan
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg|500mg
貨號：FS-X10551
產(chǎn)品介紹:
Irinotecan(CPT-11)能通過抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶1阻止DNA的解旋。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：97682-44-5 別名：(+)-Irinotecan;CPT-11 純度：98.78% 分子量：586.68 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
氏假單胞菌磷化鳥核交換因子VAV3抗體Anti-MCU Antibody固合(ALDOS)
季也蒙假絲酵母囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白A抗體Anti-MCM7 Antibody(PB0260)全色C合(HCCS)
克魯維畢赤酵母癌基因VAV2抗體Anti-MDM2 Antibody全羧合成(HLCS)
枯草芽孢桿菌囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白BAnti-MDM4 Antibody去唾液糖蛋白受體2(ASGR2)
土生類諾卡氏菌低密度脂蛋白受體抗體Anti-MDK Antibody去唾液糖蛋白受體1(ASGPR1)
果瘡痂芽枝霉神經(jīng)視錐蛋白樣1抗體(神經(jīng)鈣蛋白)Anti-MDM2 Antibody去甲腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(NET)
釀酒酵母轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白2抗體Anti-MDC1 Antibody去泛化3(DUB3)
動球菌轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白4抗體Anti-MED14 Antibody去精加壓(DDAVP)
糖螺菌絲/蘇特定蛋白磷抗體Anti-MECP2 Antibody趨化因子C-基元受體1(XCR1)
不規(guī)則分枝發(fā)簇孢血管生長因子VG5Q抗體Anti-MED13 Antibody趨化因子C-基元配體2(XCL2)
無花果上皮型鈣粘附分子抗體Anti-ME2 Antibody趨化因子C-X-C-基元受體7(CXCR7)
堆冰川居真菌細(xì)菌囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1家族蛋白抗體Anti-MED15 Antibody趨化因子C-X-C-基元受體6(CXCR6)
薄花邊傘6-2液泡分選蛋白4抗體Anti-MED20 Antibody趨化因子C-X-C-基元受體5(CXCR5)
蘑菇線粒體外膜孔蛋白3抗體（電壓依賴陰離子通道蛋白3）Anti-MED18 Antibody趨化因子C-X-C-基元受體4(CXCR4)
小單孢菌視覺抑制蛋白抗體Anti-MED4 Antibody趨化因子C-X-C-基元受體3(CXCR3)
異配囊接霉血管內(nèi)皮生長因子受體3抗體Anti-MED6 Antibody趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)
血清應(yīng)答因子抗體腦膜炎奈瑟菌大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞
蛋白抑制劑14抗體白色鏈霉菌白色亞種大鼠視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞
分泌受體抗體Lentzeasp大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞
鈉-糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗體帶小棒鏈霉菌大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞
DNA解旋抑制劑(Irinotecan)鐮刀 4--2-三氟基異酯傳染性鼻炎
甘藍(lán)黑腐病禾谷類致病變種 2--5-甲(易)卵黃高磷蛋白
大腸埃希氏 3－ 巰基正酯雌受體
黃綠青霉 唑來磷一水化合物胱
果生鏈核盤 溴鄰苯三紅色
大腸埃希氏桿 焦磷銅四水合物I群禽腺病
細(xì)鏈格孢玉蘭?；?/span> 8-溴喹啉禽腺病4型
孟氏假單胞 2-甲氧基-6-(易)禽腺病4型抗體
大腸埃希氏桿 2,7-萘二磺鈉輔Q10
糞腸球 3,4-Methylenedioxyphenethylamine Hydrochloride主要急性期蛋白
黑木耳 雙(2,4-二基)草酯(易)淀粉樣前體蛋白
枯草芽孢桿 三烯膦內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白CHOP
玫瑰色鏈霉 2-氟-6-泛化p62
枯斑擬盤多毛孢 芐基-(S)-(+)-縮水甘油轉(zhuǎn)錄激活因子-4
孟氏假單胞 4-乙基辛半胱蛋白1
