PI3K抑制劑(GSK2126458)正在熱銷的產(chǎn)品：Tenascin 固生蛋白抗原5-苯酞 97%
TEM 1/CD248(Tumor endothelial marker 1 precursor) 內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液蛋白抗原2-烯 99%
TFF3 (trefoil factor3) 三葉肽因子3(多肽)2--3-吡啶 98%
TFPI-2 (tissue factor pathway
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
中文名稱：PI3K抑制劑(GSK2126458)
英文名稱：GSK2126458
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
貨號：FS-X10593
產(chǎn)品介紹:
GSK2126458是一種高選擇性，有效的PI3K抑制劑，抑制p110α/β/δ/γ，mTORC1/2的活性，Ki值分別為0.019nM/0.13nM/0.024nM/0.06nM和0.18nM/0.3nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1086062-66-9 別名：Omipalisib 純度：99.31% 分子量：505.5 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
谷棒桿菌分泌型白蛋白抑制因子抗體Anti-PRDX4 Antibody接觸蛋白3(CNTN3)
紙葡萄穗霉2，4-二氧乙(除草劑)單克抗體Anti-PRDX4 Antibody(PB0416)接觸蛋白2(CNTN2)
曲霉尿轉(zhuǎn)運型糖蛋白抗體Anti-PRDX3 Antibody(PB0349)接觸蛋白1(CNTN1)
美澳型核果褐腐病菌雌激誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)制器抗體Anti-PRDX5 Antibody酵母脫氫(SCCPDH)
短桿狀馬賽菌14-3-3蛋白/14-3-3 α/β/γ/δ/ε亞型抗體Anti-PRDX5 Antibody(PB0417)窖蛋白3(CAV3)
南非諾卡氏菌2，4-二氧乙(除草劑)抗體Anti-PRF1 Antibody窖蛋白2(CAV2)
乳球菌屬5-羥色受體1A抗體Anti-PRDX6 Antibody(PB0350)窖蛋白(CAV1)
擬無枝菌5羥色抗體Anti-PRG2 Antibody角質(zhì)轉(zhuǎn)谷酰(TGM1)
泡盛曲霉5-羥色受體1B抗體Anti-PREB Antibody角鯊烯單加氧(SQLE)
黑曲霉神經(jīng)突觸2抗體Anti-PRKAB1 Antibody角膜蛋白(KERA)
熒光假單胞菌環(huán)指蛋白142抗體Anti-PRKAA1 Antibody角化粒(CDSN)
樹舌靈芝突觸結(jié)合蛋白3抗體Anti-PRKAB2 Antibody角化蛋白(CNFN)
蘇云金芽孢桿菌突觸相關(guān)蛋白25抗體Anti-PRKAR1A Antibody角化不良蛋白(DKC)
鐮刀菌因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白1抗體Anti-PRKCA Antibody角蛋白9(KRT9)
枯草芽孢桿菌超氧化物歧化1抗體(銅/鋅過氧化物歧化SOD)Anti-PRKCB Antibody角蛋白81(KRT81)
蟻巢傘屬超氧化物歧化2抗體Anti-PRKCA Antibody角蛋白8(KRT8)
神經(jīng)肽S受體1/G蛋白偶聯(lián)受體154抗體Microlunatusphosphovorus小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞提取物
神經(jīng)調(diào)節(jié)肽S抗體蜂房類芽孢桿菌小鼠膀胱成纖維細胞提取物
分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體唐菖蒲伯克霍爾德菌小鼠前列腺上皮細胞提取物
核受體0相關(guān)蛋白B家族2抗體變化考克氏菌小鼠膀胱上皮細胞提取物
PI3K抑制劑(GSK2126458)赭色栓 5-溴-2-甲氧基吡啶錳超氧化物歧化
枯草芽胞桿枯草亞種 3,5-二溴-2-羥基吡啶含錳核糖核還原
田無鏈霉 2-羥基-5-吡啶精
谷棒桿 2-甲氧基-3,5-二溴吡啶甘油二酯
頭狀禿馬勃 化釔雙核精
綠黃鏈霉 2-羥基-4-脂多糖；內(nèi)
Aeromonas aquariorum 3--2-羥基吡啶磷化MEK1;2
林生毛霉 硫釤(III)，八水合物磷化外信號調(diào)節(jié)激
美澳型核果褐腐病 化釤,六水磷化絲裂原活化蛋白激1
密歇根棍狀桿標記亞種 溴化鎘,四水磷化真核起始因子結(jié)合蛋白1
甜菜慢生根瘤 硫銦磷化含ETS域Elk1蛋白
枯草芽孢桿 化鎳磷化外信號調(diào)節(jié)激1;2
枯草芽胞桿枯草亞種 溴化鎳磷化絲裂原活化蛋白激
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
