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中文名稱：CDK1抑制劑(Ro-3306)
英文名稱：Ro-3306
產品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10426
產品介紹:
英文名稱：Ro-3306 產品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Ro-3306是一種有效的，選擇性的CDK1抑制劑，對CDK1，CDK1/cyclin B1和CDK2/cyclin E的Ki值為分別為20nM，35nM和340nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：872573-93-8 純度：96.77% 分子量：351.45 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
小平菇（秀珍菇）磷化P63腫瘤抑制基因抗體Anti-C9orf72 AntibodyToll樣受體4(TLR4)
小單孢菌磷化P63腫瘤抑制基因抗體Anti-CA1 AntibodyToll樣受體3(TLR3)
橢園釀酒酵母蛋白甘露糖基轉移1抗體Anti-CA12 Antibodytoll樣受體2(TLR2)
熱帶假絲酵母磷化嗜中性粒胞漿因子4抗體Anti-CA2 AntibodyToll樣受體1(TLR1)
鴨疫里氏桿菌核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CA4 AntibodyTH糖蛋白(THP)
松針散斑殼磷化核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CA3 Antibody(PB1104)TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)
根瘤菌磷化核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CACNA1C Antibody(PB0394)Tau蛋白(TAU)
威爾酵母磷化核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CA4 AntibodyTau-231蛋白(TAU-231)
謝瓦散囊菌磷化核糖體S6K2蛋白激抗體Anti-CACNA2D2 AntibodyTau-181蛋白(TAU-181)
小克銀漢霉C0磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CACYBP AntibodyTAR DNA結合蛋白43(TARDBP/TDP43)
植物乳桿菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CACNA1D Antibody(PB0286)s腺同型半胱(SAH)
魚乳桿菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CAD AntibodySyndecan-3/(SDC3)
卷枝毛霉卷枝變型磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CACYBP AntibodySyndecan-1/CD138(SDC1)
毛柄金錢菌(金針菇)磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CALB2 AntibodySTEAP家族成員4(Steap4)
黑曲霉磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CALB1 Antibody(PB0017)STEAP家族成員1(Steap1)
大腸桿菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CADM1 AntibodyStathmin 1(STMN1)
: AS4.252資源名稱: 白黃鏈霉菌 質量規(guī)格：>99%
: AS4.166資源名稱: 黃色長孢鏈霉菌 質量規(guī)格：0.98
金頂側耳Pleurotus│citrinopileatus Singer 質量規(guī)格：>99%,BR
CDK1抑制劑(Ro-3306)大腸埃希氏 二烯二乙二酯谷脫羧1
栗疫 4-羥基-1-茚酮谷脫羧2
灰玫瑰青霉 雙(三-o-甲苯基膦)二化鈀(II)脂肪連接
墻支頂孢 2-羥基-4-甲氧基-5-磺二苯甲酮硬脂酰去飽和2
蘇云金芽孢桿 (S,S)-(-)-雙(α-甲芐基)鹽鹽弓形蟲IgG抗體
科恩氏 2.6-二氟-4-甲氧基苯血小板膜糖蛋白纖維蛋白原受體
球形賴芽孢桿 雙酮-D-半乳糖可溶性血纖蛋白單體復合物
美澳型核果褐腐病 烯基二二甲酯Ⅶ
短波單胞 2-乙酰氧基異丁酰溴V
白鱗炭角 5′-O-(4,4′-二甲氧基三苯甲基)胸Ⅺ
斯氏李斯特氏 N-BOC-2-氨基-5-溴噻唑線粒體呼吸鏈復合物I
變天藍鏈霉 4-(二甲基氨甲?；?苯Xa
糞鞘氨桿 三丁雙(三氟甲磺酰)亞XIa
根瘤 N,N'-雙芐氧羰基-L-賴Disabled同源物1
短芽孢桿屬 3-氟-4-羥基苯磷化Disabled同源物1
