SMYD3和MEKK2抑制劑(EPZ031686)正在熱銷的產(chǎn)品：IL-17 大鼠白介-17己二二酯 CP,98%
IL-18 大鼠白介-18己二二酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)
IL-19 大鼠白介-191,10-癸二 98%
IL-20 大鼠白介-20烯縮水甘油酯 98%
IL-21 大鼠白介-21正己 99%
IL-22 大鼠白介-221,6-己二
產(chǎn)品介紹:
EPZ031686是一個Ki分別是1.2nM和1.1nM的SMYD3和MEKK2的非競爭抑制劑。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1808011-22-4 純度：99.60% 分子量：591.09 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱：SMYD3和MEKK2抑制劑(EPZ031686)
英文名稱：EPZ031686
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10662
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
橄欖綠鏈霉菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XPC Antibody叢狀蛋白C1(PLXNC1)
青春雙歧桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XPO1 Antibody叢狀蛋白B3(PLXNB3)
海藻希瓦氏菌PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XPO5 Antibody叢狀蛋白B2(PLXNB2)
圈卷產(chǎn)色鏈霉菌淡色變種堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC1 Antibody叢狀蛋白B1(PLXNB1)
豬屎豆根瘤菌FITC標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC1 Antibody叢狀蛋白A4(PLXNA4)
雜色曲霉羅丹明標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC1 Antibody叢狀蛋白A3(PLXNA3)
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC3 Antibody叢狀蛋白A2(PLXNA2)
美澳型核果褐腐病菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC2 Antibody叢狀蛋白A1(PLXNA1)
豬丹絲菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-XRCC3 Antibody猬因子相互作用蛋白(HHIP)
雅致栓孔菌Cy7標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-XRCC4 Antibody(PB0954)猬?；D(zhuǎn)移(HHAT)
東方伊薩酵母羅丹明標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-Xrcc4 Antibody核糖基轉(zhuǎn)移1(HPRT1)
白淺灰鏈霉菌FITC標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-XRCC2 Antibody雌(E1)
納瓦河部落奇異球菌堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-XRCC5 Antibody雌激受體相關(guān)受體α(ERRα)
綠色鏈霉菌膠體金標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-XRCC5 Antibody(PB0411)雌激受體β(ERβ)
小孔異擔(dān)子菌Cy3標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-XRCC5 Antibody雌激受體α(ERα)
洛格酵母Cy5標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-YBX1 Antibody垂體腫瘤轉(zhuǎn)化1相互作用蛋白(PTTG1IP)
磷化絲/蘇/酪抗體嗜鹽細(xì)菌屬小鼠脈絡(luò)膜組織提取物
核仁同源蛋白17抗體睪丸叢毛單胞菌小鼠角膜組織提取物
蛋白酪磷相互作用蛋白51抗體新鞘單胞菌小鼠腦靜脈血管組織提取物
前列腺相關(guān)P抗原家族成員1抗體蜃樓耶爾森氏菌小鼠嗅鞘組織提取物
SMYD3和MEKK2抑制劑(EPZ031686)豬鏈球 2-噻吩二磷腺
假單胞 1,3-二溴-2-煙酰腺二核磷
橡膠疫霉 (±)-2-氨基-1-丁煙酰腺二核
地衣芽孢桿 1,2,3-三溴烷NADH
克魯維尼爾巴克利酵母 4-間苯二結(jié)核病
非洲黑蛋巢 2-氨基-4-煙酰腺二核磷
南類芽孢桿 4-鄰苯二單純皰疹病抗原1
大腸埃希氏桿 7-氨基頭孢霉烷巴氏桿抗體
海洋伍斯 2--1,4-二坦唑
淡紫褐鏈霉 (R)-4-異基-2-惡唑烷酮過氧化氫
七角井鹽單胞 苯并噻唑Toll樣受體4
靈芝 苯并噻吩腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6
果生鏈核盤 茚腺病
德里腐霉 (R)-(+)-1,1,2-三苯基-1,2-乙二副流感病
曲霉 三[2-苯基吡啶-C2,N]銥(III)狂犬病抗原
